د څارویو نسج مستقیم PCR کټ (پرته د نمونې وسیلې) پروتوکول
د کټ تفصیل:
په مستقیم ډول د څارویو نسج lysate د PCR امپلیفیکیشن لپاره د ټیمپلیټ په توګه وکاروئ، پرته د DNA جلا جلا استخراج، چټک او لوړ حساسیت.
◮هیڅ وخت مصرف او ګران DNA پاکولو ته اړتیا نشته.
◮د نمونې غوښتنه لږه ده، یوازې یو تخم واخلئ.
◮هیڅ ځانګړي درملنې ته اړتیا نشته لکه پیس کول او کرش کول، او عملیات ساده دي.
◮د PCR مطلوب سیسټم PCR ته وړتیا ورکوي چې د PCR عکس العمل مخنیوی کونکو ته لوړ ځانګړتیا او قوي زغم ولري.
توضیحات
دا کټ د PCR عکس العملونو لپاره د څارویو نسجونو نمونو څخه د جینومیک DNA د ژر تر ژره خوشې کولو لپاره یو ځانګړی لیسیز بفر سیسټم کاروي ، نو دا په ځانګړي توګه د لوی پیمانه جینیاتي ازموینې لپاره مناسب دی.
د لیسیز بفر څخه د جینومیک DNA خوشې کولو پروسه په 10-30 دقیقو کې په 65 درجو کې بشپړیږي.نورې پروسې لکه پروټین او RNA لرې کولو ته اړتیا نشته، او خوشې شوي ټریس DNA د PCR عکس العمل لپاره د نمونې په توګه کارول کیدی شي.
2× PCR اسانهTMمکس د PCR عکس العمل مخنیوی کونکو ته قوي زغم لري ، او کولی شي د نمونې lysate څخه کار واخلي ترڅو د مؤثره او ځانګړي لوړولو لپاره د نمونې په توګه ازمول شي.دا ریجنټ د Foregene D-Taq DNAPolymerase، dNTPs، MgCl لري2د غبرګون بفر، د PCR اصلاح کوونکی او ثبات ورکوونکی.
D-Taq DNA پولیمیریز د DNA پولیمیریز دی چې په ځانګړي ډول د PCR مستقیم عکس العملونو لپاره د فارجین لخوا رامینځته شوی.د D-Taq DNA پولیمیریز د PCR عکس العمل مختلف ډولونو ته قوي زغم لري، او کولی شي په اغیزمنه توګه په مختلفو پیچلي غبرګون سیسټمونو کې د DNA اندازه اندازه کړي، او د پراخولو سرعت کولی شي 2Kb/min ته ورسیږي، کوم چې په ځانګړې توګه د مستقیم PCR غبرګون لپاره مناسب دی.
مشخصات
50×20µl rxns، 200×20µl rxns، 500×20µl rxns، 2000×20µl rxns
د کټ اجزا
| لومړۍ برخه | بفر AL |
| Foregene Protease | |
| 6× د DNA بار کولو بفر | |
| دویمه برخه | 2× PCR اسانهTMمخلوط |
ځانګړتیاوې او ګټې
■هیڅ وخت مصرف او ګران DNA پاکول
■ د نمونې غوښتنه لږه ده، د 5mg په اندازه د څارویو نسج ازموینه کیدی شي.
■ هیڅ ځانګړي درملنې ته اړتیا نشته لکه پیس کول او کرش کول، او عملیات ساده دي.
■ د PCR اصلاح شوی سیسټم د PCR لوړ ځانګړتیا او د PCR عکس العمل مخنیوی کونکو ته قوي زغم رامینځته کوي.
د کټ پیرامیټونه
غوښتنلیک: د څارویو د نسجونو ډول.
DNA د نمونې لیسز څخه خوشې شوی: یوازې د PCR ټیمپلیټ په توګه کارول کیږي.
کټ د لاندې موخو لپاره کارول کیدی شي: د ټرانسجینوس پیژندنه، د څارویو جینټایپنګ، او داسې نور.
د کار جریان
د ذخیره کولو او شیلف ژوند
د دې کټ لومړۍ برخه باید په 2-8 کې زیرمه شي℃.
د ریجنټ بفر AL په وچو شرایطو کې د 12 میاشتو لپاره زیرمه کیدی شي؛دا په 2-8 کې زیرمه کیدی شي℃د اوږدې مودې ذخیره کولو لپاره.
Reagent Foregene Protease یو ځانګړی فورمول لري.د دې د فعالیت او ثبات ډاډ ترلاسه کولو لپاره، مهرباني وکړئ دا په 4 کې ذخیره کړئ℃د 12 میاشتو لپاره.
Reagent 6×د DNA بار کولو بفر په 4 کې زیرمه کیدی شي℃یا -20℃د اوږد مهال لپاره.
د دې کټ دویمه برخه باید په -20 کې زیرمه شي℃.
Reagent 2×PCR اسانهTMمخلوط د 12 میاشتو لپاره په -20 کې ساتل کیدی شي℃;که دا په مکرر ډول وکارول شي ، دا په 4 کې هم زیرمه کیدی شي℃د لنډ مهاله ذخیره کولو لپاره (د 10 ورځو دننه کارول).
