زما په ذهن کې د کشف ټیکنالوژۍ په تاریخ کې ډیری انقلابي اختراعات د انټيجن انټي باډي ځانګړي پابندۍ ، PCR ټیکنالوژۍ او ترتیب کولو ټیکنالوژۍ اصولو پراساس د معافیتي ټیکنالوژۍ ټیکنالوژي دي.نن موږ به د PCR ټیکنالوژۍ په اړه وغږیږو.د PCR ټیکنالوژۍ د تکامل له مخې ، خلک په عادت سره د PCR ټیکنالوژي په دریو نسلونو ویشي: عادي PCR ټیکنالوژي ، د ریښتیني وخت فلوروسینټ مقداري PCR ټیکنالوژي او ډیجیټل PCR ټیکنالوژي.
Cد ommon PCR تخنیک
کیري مولیس (1944.12.28-2019.8.7)
کیري مولیس په 1983 کې د پولیمیریز چین عکس العمل (پولیمیریز چین عکس العمل ، PCR) اختراع کړ. ویل کیږي کله چې هغه د خپلې ملګرې موټر چلاوه نو ناڅاپه یې د PCR اصول (د موټر چلولو ګټو په اړه) فکر وکړ.کیري مولیس ته په ۱۹۹۳ کال کې د کیمیا په برخه کې د نوبل جایزه ورکړل شوه. نیویارک ټایمز داسې تبصره وکړه: "ډیر اصلي او د پام وړ، تقریبا بیولوژي د PCR څخه مخکې او د PCR څخه وروسته دوره کې ویشل کیږي.
د PCR اصول: د DNA پولیمیریز د کتلیزیز لاندې، د مور سټرینډ DNA د ټیمپلیټ په توګه کارول کیږي، او ځانګړی پریمر د تمدید د پیل نقطې په توګه کارول کیږي، او د لور سټرنډ DNA د مور سټرنډ ټیمپلیټ لپاره بشپړونکي DNA د ډینټوریشن، انیل کولو، توسیع او نورو مرحلو له لارې په ویټرو کې کاپي کیږي.دا په ویټرو کې د DNA ترکیب امپلیفیکیشن ټیکنالوژي ده ، کوم چې کولی شي په ګړندۍ او په ځانګړي ډول په ویټرو کې کوم هدف DNA پراخه کړي.
د عادي PCR ګټې
1.کلاسیک میتود، بشپړ نړیوال او کورني معیارونه
2.د وسیلې ریجنټ ټیټ لګښت
3.د PCR محصولات د نورو مالیکول بیولوژی تجربو لپاره ترلاسه کیدی شي
وړاندیز شوی فارجین PCR ماشین: https://www.foreivd.com/foreamp-sn-695-series-thermal-cycler-96-wells-pcr-machine-product/
اړوند محصولات: https://www.foreivd.com/pcr-herotm-with-dye-product/
د عادي PCR زیانونه
1.د ککړتیا لپاره اسانه
2.ستونزمن عملیات
3.یوازې کیفیتي تحلیل
4.اعتدال حساسیت
5.غیر مشخص پراخوالی شتون لري، او کله چې غیر مشخص بانډ د هدف بډ په څیر ورته اندازه وي، دا نشي توپیر کولی.
Cد اپلري الیکٹروفورسس پراساس PCR
د عادي PCR نیمګړتیاو ته په ځواب کې ، ځینې جوړونکو د کیپیلري الیکٹروفورسیس اصولو پراساس وسایل معرفي کړي.د PCR امپلیفیکیشن وروسته د الیکٹروفورسیس مرحله په کیپیلري کې بشپړیږي.حساسیت لوړ دی، او د څو اډو توپیر کولی شي توپیر وکړي او امپلیفیکیشن د MAERKER لخوا محاسبه کیدی شي.د محصول محتوا.نیمګړتیا دا ده چې د PCR محصول لاهم باید خلاص شي او وسیلې ته واچول شي ، او لاهم د ککړتیا لوی خطر شتون لري.
CاپلريEلیکټروفورسیس
2. د ریښتیني وخت فلوروسینټ مقداري PCR (کمیتي ریښتیني وخت PCR ، qPCR) ټیکنالوژيد فلوروسینټ مقداري PCR چې د ریښتیني وخت PCR په نوم هم یادیږي، یوه نوې نیوکلیک اسید مقداري ټیکنالوژي ده چې د PE (پرکین ایلمر) لخوا په 1995 کې رامینځته شوې. د فلوروسینټ مقداري PCR پراختیا تاریخ د جنات لکه ABI، Roche، او Bio-IR په څیر د روح هڅوونکي مبارزې تاریخ دی.که تاسو لیوالتیا لرئ، تاسو کولی شئ دا وګورئ.دا تخنیک اوس مهال ترټولو بالغ او په پراخه کچه کارول شوی نیم کمیتي PCR تخنیک دی.
وړاندیز شوی qPCR ماشین: https://www.foreivd.com/mini-real-time-pcr-system-forequant-sf2sf4-product/
د فلوروسینټ رنګ کولو طریقه (SYBR شنه I):SYBR ګرین I د کمیتي PCR لپاره ترټولو عام کارول شوی DNA - پابند رنګ دی ، کوم چې په غیر مشخص ډول د دوه اړخیزه DNA سره تړلی دی.په آزاد حالت کې، SYBR ګرین کمزوری فلوروسینس خپروي، مګر یوځل چې دوه ځله تړل شوي DNA پورې تړلی وي، د هغې فلوروسینس 1000 چنده زیاتیږي.له همدې امله، د عکس العمل لخوا خارج شوي ټول فلوروسینټ سیګنال د موجود دوه ګونی ډنډ شوي DNA مقدار سره متناسب دی او د پراخ شوي محصول له زیاتوالي سره به وده وکړي.څرنګه چې رنګ په غیر مشخص ډول په دوه اړخیزه DNA پورې تړلی دی، غلط مثبت پایلې تولید کیدی شي.
اړوند محصولات: https://www.foreivd.com/real-time-pcr-easytm-sybr-green-i-kit-product/
د فلوروسینټ تحقیقاتو طریقه (تقمان ټیکنالوژي): دوراند PCR امپلیفیکیشن ، یو ځانګړی فلوروسینټ پروب په ورته وخت کې د پریمرونو جوړه په توګه اضافه کیږي.پروب یو خطي اولیګونیوکلیوټایډ دی چې په ترتیب سره د فلوروسینټ راپور ورکوونکي ګروپ او د فلوروسینټ quencher ګروپ سره په دواړو سرونو کې لیبل شوی.کله چې تحقیقات ثابت وي، د راپور ورکوونکي ګروپ لخوا خارج شوي فلوروسینټ سیګنال د قویونکي ګروپ لخوا جذب کیږي، او کشف کول د فلوروسینټ سیګنال شتون نلري؛د PCR امپلیفیکیشن (د تمدید په مرحله کې)، د Taq انزایم د 5'-3' Dicer فعالیت به پروب هضم او تخریب کړي، د دې لپاره چې د راپور ورکوونکي فلوروسینټ ګروپ او quencher فلوروسینټ ګروپ جلا شي، ترڅو د فلوروسینټ د څارنې سیسټم د فلوروسینټ سیګنال ترلاسه کړي، دا چې هر وخت د چاکلین فلو ریښتیني بڼه وي. د فلوروسینټ سیګنالونو راټولولو او د PCR محصولاتو رامینځته کولو بشپړ همغږي izes.د تقمان تحقیقاتو میتود په کلینیکي کشف کې ترټولو عام د کشف میتود دی.
اړوند محصولات: https://www.foreivd.com/quickeasy%e1%b5%80%e1%b4%b9-real-time-pcr-kit-taqman-product/
د qPCR ګټې
1.میتود بالغ دی او ملاتړ کونکي تجهیزات او ریجنټونه بشپړ دي
2.د reagents منځنی لګښت
3.کارول اسانه دي
4.د لوړ کشف حساسیت او ځانګړتیا
د qPCR زیانونه
د هدف جین بدلون د ورک شوي کشف لامل کیږي.
د ټیټ غلظت ټیمپلیټ کشف پایله نشي ټاکل کیدی.
د کمیتي کشف لپاره د معیاري وکر کارولو په وخت کې لویه تېروتنه شتون لري.
3. ډیجیټل PCR (ډیجیټل PCR، dPCR) ټیکنالوژي
ډیجیټل PCR د نیوکلیک اسید مالیکولونو مطلق مقدار کولو تخنیک دی.د qPCR سره پرتله کول، ډیجیټل PCR کولی شي په مستقیم ډول د DNA/RNA مالیکولونو شمیر ولولي، کوم چې په پیل شوي نمونه کې د نیوکلیک اسید مالیکولونو مطلق مقدار دی.په 1999 کې، Bert Vogelstein او Kenneth W. Kin-zler په رسمي توګه د dPCR مفهوم وړاندیز وکړ.
په 2006 کې، Fluidigm لومړی و چې د سوداګریز چپ پر بنسټ dPCR وسیله یې تولید کړه.په 2009 کې، د ژوند ټیکنالوژۍ د OpenArray او QuantStudio 12K Flex dPCR سیسټمونه په لاره واچول.په 2013 کې، د ژوند ټیکنالوژیو د QuantStudio 3DdPCR سیسټم پیل کړ، کوم چې د لوړ کثافت نانوسکل مایکرو فلوایډیک چپ ټیکنالوژي کاروي ترڅو نمونې په مساوي ډول 20,000 انفرادي حجرو ته توزیع کړي.په ښه غبرګون کې.
په 2011 کې، Bio-Rad د څاڅکو پر بنسټ د QX100 dPCR وسیله په لاره واچوله، کوم چې د اوبو په تیلو ټیکنالوژي کاروي ترڅو نمونه په مساوي ډول په 20,000 څاڅکو-اوبو-تیلو کې توزیع کړي، او د څاڅکو تحلیل لپاره د څاڅکو تحلیل کونکي کاروي.په 2012 کې، RainDance د RainDrop dPCR وسیله په لاره واچوله، چې د لوړ فشار ګاز لخوا پرمخ وړل کیږي، ترڅو د هر معیاري غبرګون سیسټم د عکس العمل ایمولشن کې تقسیم کړي چې د 1 ملیون څخه تر 10 ملیون پیکولیټر کچې مایکرو څاڅکي لري.
تر دې دمه ، ډیجیټل PCR دوه لویې ډلې رامینځته کړې ، د چپ ډول او د څاڅکو ډول.مهمه نده چې کوم ډول ډیجیټل PCR وي ، د دې اصلي اصول د کمولو ، پای ټکی PCR او د پویسون توزیع محدودوي.د معیاري PCR عکس العمل سیسټم چې د نیوکلیک اسید ټیمپلیټونه لري په مساوي ډول په لسګونو زره PCR عکس العملونو ویشل شوي ، کوم چې په چپس یا مایکروډروپلیټونو ویشل شوي ، نو هر عکس العمل د امکان تر حده د ټیمپلیټ مالیکول لري ، او د واحد مالیکول ټیمپلیټ PCR عکس العمل ترسره کیږي.د فلوروسینس په لوستلو سره د سیګنال شتون یا نشتوالی شمیرل کیږي، او مطلق مقدار د احصایوي Poisson ویش له انډول کولو وروسته ترسره کیږي.
لاندې د څو ډیجیټل PCR پلیټ فارمونو ځانګړتیاوې دي چې ما کارولې دي:
1. بایو راډ QX200 څاڅکي ډیجیټل PCR بایو راډQX200 یو خورا کلاسیک ډیجیټل PCR پلیټ فارم دی ، د موندلو لومړني پروسه: 20,000 نمونې د څاڅکي جنریټر لخوا رامینځته کیږي د اوبو په تیلو مایکرو څاڅکي په یو عادي PCR ماشین کې پراخه کیږي ، او په پای کې د هر مایکرو څاڅکي فلوروسینس سیګنال د مایکرو ډراپټ ریډر لخوا لوستل کیږي.عملیات ډیر پیچلي دي، او د ککړتیا خطر منځنی دی.
Xinyi TD1 مایکرو څاڅکي ډیجیټل PCRXinyi TD1 د کورني ډیجیټل PCR پلیټ فارم دی، د کشف کولو بنسټیز بهیر: د څاڅکي جنراتور له لارې د 30,000-50,000 اوبو کې د تیلو څاڅکي تولید کړئ، په یو عام PCR وسیله پراخ کړئ، او په پای کې د څاڅکي لوستونکی د هر څاڅکي فلوروسینټ سیګنال لوستل کوي.په دې پلیټ فارم کې د څاڅکي تولید او لوستل دواړه په وقف شوي چپ کې د ککړتیا ټیټ خطر سره ترسره کیږي.
سټیلا نایکا مایکرو ډراپل چپ ډیجیټل PCRسټیلا نایکا نسبتا نوی ډیجیټل PCR پلیټ فارم دی.د کشف اصلي پروسه دا ده: چپ ته د عکس العمل حل اضافه کړئ ، چپ د مایکرو څاڅکو تولید او امپلیفیکیشن سیسټم کې واچوئ ، او 30,000 مایکرو څاڅکي تولید کړئ.په چپ باندې خپریږي، او د PCR امپلیفیکیشن په چپ کې بشپړ شوی.بیا پراخ شوی چپ د مایکرو څاڅکو لوستلو تحلیل سیسټم ته لیږدول کیږي ، او د فلوروسینټ سیګنال د عکسونو اخیستلو سره لوستل کیږي.څرنګه چې ټوله پروسه په تړل شوي چپ کې ترسره کیږي، د ککړتیا خطر کم دی.
4. ThermoFisher QuantStudio 3D چپ ډیجیټل PCR
ThermoFisher QuantStudio 3D یو بل کلاسیک چپ میشته ډیجیټل PCR پلیټ فارم دی.د دې اصلي کشف پروسه دا ده: د عکس العمل محلول په سپریډر کې اضافه کړئ ، او د عکس العمل محلول په مساوي ډول په چپ باندې د 20,000 مایکرو ویلونو سره د سپریډر له لارې خپور کړئ.، چپ د PCR ماشین کې واچوئ ترڅو پراخه شي ، او په پای کې چپ لوستونکي ته واچوئ او د فلوروسینټ سیګنال لوستلو لپاره عکس واخلئ.عملیات نسبتا پیچلي دي، او ټوله پروسه په تړل شوي چپ کې ترسره کیږي، او د ککړتیا خطر کم دی.
5. JN MEDSYS روښانه چپ ډیجیټل PCR
JN MEDSYS روښانه کول نسبتا نوی چپ ډول ډیجیټل PCR پلیټ فارم دی.د دې اصلي کشف پروسه دا ده: د عکس العمل محلول په اپلیکټر کې اضافه کړئ ، او د عکس العمل محلول په مساوي ډول په 10,000 PCR ټیوبونو کې د اپلیکېټر له لارې په PCR ټیوب کې تنظیم کړئ.په مایکروپورس چپ کې، د عکس العمل محلول د کیپیلري عمل له لارې چپ ته ننوځي، او د چپ سره د PCR ټیوب د PCR ماشین کې د امپلیفیکیشن لپاره ایښودل کیږي، او په پای کې چپ د عکس اخیستلو په واسطه د فلوروسینټ سیګنال لوستلو لپاره لوستونکي ته اچول کیږي.عملیات ډیر پیچلي دي.د ککړتیا خطر کم دی.
د هر ډیجیټل PCR پلیټ فارم پیرامیټونه په لاندې ډول لنډیز شوي دي:
د ډیجیټل PCR پلیټ فارم د ارزونې شاخصونه دي: د ویشلو واحدونو شمیر، د فلوروسینټ چینلونو شمیر، د عملیاتو پیچلتیا او د ککړتیا خطر.مګر ترټولو مهم شی د کشف دقت دی.د ډیجیټل PCR پلیټ فارمونو ارزولو یوه لاره د یو بل تصدیق کولو لپاره د ډیری ډیجیټل PCR پلیټ فارمونو کارول دي ، او بله لاره د دقیقو ارزښتونو سره د معیاري موادو کارول دي.
د dPCR ګټې
1.مطلق مقدار ترلاسه کول
2.لوړ حساسیت او ځانګړتیا
3.کولی شي د ټیټ کاپي نمونې کشف کړي
د dPCR زیانونه1. قیمتي تجهیزات او ریجنټونه 2. پیچلي عملیات او د کشف اوږد وخت 3. د کشف کولو محدود حد
په اوس وخت کې، د PCR ټیکنالوژۍ درې نسلونه خپلې ګټې او زیانونه لري، او هر یو د خپل غوښتنلیک ساحې لري، او دا اړیکه نه ده چې یو نسل د بل نسل ځای ونیسي.د ټیکنالوژۍ دوامداره پرمختګ د PCR ټیکنالوژۍ کې نوی حیاتي ځواک انجیکشن کړی، دا توان ورکوي چې د یو اپلیکیشن سمت له بل وروسته خلاص کړي، د نیوکلیک اسید کشف ډیر اسانه او دقیق کړي.
سرچینه: ډاکټر یوان تاسو د ازموینې لپاره لیږي
وړاندیز شوي محصولات:
د پوسټ وخت: نومبر-18-2022
