د نبات ټول RNA جلا کولو کټ پلس د نبات لپاره د RNA پاکولو کټ ټولټال په پولیساکرایډونو او پولیفینولونو کې بډای دی
د کټ تفصیل:
Cat.No.RE-05021/05022/05024
د عمومي نبات نمونو څخه د ټول RNA پاکولو لپاره چې لوړ پولیساکریډ او پولیفینول اجزا لري.
په چټکۍ سره د لوړ کیفیت ټول RNA د نبات نمونو څخه استخراج کړئ چې د لوړ محتوياتو پولیساکرایډونو او پولیفینولونو سره.
د DNA پاکولو کالم په کارولو سره RNase وړیا
ساده - ټول عملیات د خونې په حرارت کې بشپړ شوي
چټک عملیات په 30 دقیقو کې بشپړ کیدی شي
خوندي - هیڅ عضوي ریجنټ نه کارول کیږي 
مشخصات
50 تیاری، 200 تیاری
کټ د سپن کالم او فورمول څخه کار اخلي چې د Foregene لخوا رامینځته شوی، کوم چې کولی شي په اغیزمنه توګه د لوړ پاکوالي او لوړ کیفیت ټول RNA د مختلفو نبات نسجونو څخه استخراج کړي چې لوړ پولیساکریډ یا پولیفینول مواد لري.دا د DNA - پاکولو کالم چمتو کوي چې کولی شي په اسانۍ سره جینومیک DNA د سپرناټینټ او نسج لیزیټ څخه لرې کړي.یوازې RNA کالم کولی شي په مؤثره توګه RNA وتړي.کټ کولی شي په ورته وخت کې ډیری نمونې پروسس کړي.
ټول سیسټم RNase نلري، نو پاک شوی RNA به تخریب نشي.Buffer PRW1 او Buffer PRW2 کولی شي ډاډ ترلاسه کړي چې ترلاسه شوي RNA د پروټین، DNA، آئنونو، او عضوي مرکباتو لخوا ککړ شوي ندي.
د کټ اجزا
| بفر PSL1، بفر PS، بفر PSL2 |
| بفر PRW1، بفر PRW2 |
| د RNase وړیا ddH2O، د DNA پاکولو کالم |
| RNA-یوازې کالم |
ځانګړتیاوې او ګټې
■ د ټولې پروسې په اوږدو کې د خونې د حرارت درجه (15-25 ℃) کې عملیات، پرته له یخ حمام او د ټیټ تودوخې سنټرفیوګیشن.
■ بشپړ کټ RNase وړیا، د RNA تخریب په اړه اندیښنه ته اړتیا نشته.
■ په ځانګړې توګه د پولی ساکرایډونو او پولیفینولونو نبات نمونو څخه د RNA د پاکولو لپاره مناسب.
■ د DNA - پاکولو کالم په ځانګړې توګه د DNA سره تړلی دی، ترڅو کټ کولی شي د DNase اضافه کولو پرته د جینومیک DNA ککړتیا لرې کړي.
■ لوړ RNA حاصل: RNA یوازې کالم او ځانګړی فورمول کولی شي په اغیزمنه توګه RNA پاک کړي.
■ ګړندی سرعت: د کار کولو لپاره اسانه او په 30 دقیقو کې بشپړ کیدی شي.
■ خوندیتوب: هیڅ عضوي ریجنټ ته اړتیا نشته.
■ لوړ کیفیت: پاک شوي RNA ټوټې د لوړ پاکوالي څخه دي، د پروټین او نورو ناپاکۍ څخه پاک دي، او کولی شي د مختلفو تجربوي غوښتنلیکونو سره مخ شي.
د محصول پیرامیټونه
■ د ښکته کیدو غوښتنلیکونه: د لومړي سټینډ cDNA ترکیب، RT-PCR، مالیکولر کلونینګ، شمالي بلاټ، او نور.
■ نمونه: د پولی ساکرایډونو او پولیفینول تازه یا منجمد نبات نسجونه
■ دوز: 50mg نبات نسج
■ د پاکولو کالم اعظمي RNA پابند ظرفیت: 80 μg
■ د Elution حجم: 50-200 μl
د کټ غوښتنلیک
دا د تازه یا منجمد نبات نسجونو نمونو (په ځانګړې توګه د تازه نبات پاڼي نسج) څخه د لوړ پولیساکریډ او پولیفینول مینځپانګې سره د ټول RNA استخراج او پاکولو لپاره مناسب دی.
د کار جریان
ډياګرام
د نبات ټول RNA جلا کولو کټ پلس 50 ملی ګرامه تازه پاڼي د پولی سیکرایډونو او پولیفینول پروسس کړي، او 5٪ پاک شوي RNA د الکتروفورسیس لخوا ازمول شوي.
۱: کیله
۲: جینکو
۳: پنبه
۴: انار
د ذخیره کولو او شیلف ژوند
دا کټ د 24 میاشتو لپاره په وچو شرایطو کې د خونې د حرارت درجه (15-25 ℃) کې زیرمه کیدی شي؛که دا د اوږدې مودې لپاره ذخیره کولو ته اړتیا ولري، دا په 2-8 ℃ کې زیرمه کیدی شي.
بفر PSL1 د β-mercaptoethanol اضافه کولو وروسته د 1 میاشتې لپاره په 4℃ کې کیښودل کیدی شي (دا سپارښتنه کیږي چې دا د تجربې په ورته وخت کې اضافه کړئ).
کالم پلګ شوی
وروسته له دې چې کالم پلګ شوی، د RNA حاصل کم شوی یا حتی د RNA پاکول ناممکن دي، او ترلاسه شوي RNA ډله ټیټه ده.
د عام لامل تحلیل:
1. د نمونې وقفې بشپړې ندي.
د نمونې ماتول په بشپړ ډول د DNA - کلیننګ کالم د بندیدو لامل نه کیږي ، پداسې حال کې چې د RNA حاصل او کیفیت اغیزه کوي.موږ سپارښتنه کوو چې په کافي اندازه مایع نایټروجن کې د چټک پیس کولو عملیات ترسره کړئ کله چې تاسو نمونې مات کړئ، هڅه وکړئ د نمونې د حجرو دیوال، د حجرو غشا او نور نسج مات کړئ.د پولیول پولی سیکرایډونو د نبات نمونو لپاره، موږ وړاندیز کوو چې تاسو د نبات ټول RNA جلا کولو کیټ پلس وکاروئ.
2. کله چې جلا شوي نمونې سپرناټینټ د DNA-Cleaning کالم سره سکشن شي، ممکن د حجرو ټوټه شوې ورقه تنفس شي.
د حجرو ټوټې شوي ټوټې اخیستل به د RNA-ONLY کالم لامل شي چې د RNA جذب عملیات ترسره کولو پرمهال به بند شي (6 ګام وګورئ).موږ تاسو ته په احتیاط سره وړاندیز کوو کله چې دا سپرناټینټ سکشن کړئ ترڅو د حجرو کثافاتو څخه مخنیوی وشي.
3. د نمونې ابتدايي اندازه ډیره ده.
د نمونې ډیر کارول به د بفر PSL1 لخوا د نمونې نیمګړتیا یا د حجرو نیمګړتیا لامل شي ، چې د پاکولو پرمهال د پاکولو کالم بندیدو لامل کیږي.د نبات ټول RNA جلا کولو کټ هر یو پاک شوی عملیاتي نمونه 50 ملی ګرامه ده.د پولیول پولی سیکرایډونو د نبات نمونو لپاره، موږ سپارښتنه کوو چې تاسو د نبات ټول RNA جلا کولو کیټ پلس هڅه وکړئ.
4. د سینټرفیوج د حرارت درجه ډیره ټیټه ده.
د RNA د جلا کولو او پاکولو ټوله پروسه د خونې د حرارت درجه (20-25) کې ترسره کیږي°C)، پرته له دې چې د نمونې نسج د مایع نایتروجن لخوا مات شوی وي. د ځینو کریوجنیک سنټرفیوجونو تودوخه د 20 څخه ټیټه ده.℃، کوم چې ممکن د DNA - پاکولو کالم او / یا RNA - یوازې کالم د بندیدو لامل شي.که دا پیښ شي، د سینټرفیوج تودوخه 20-25 ته تنظیم کړئ℃، اوډاډ ترلاسه کړئ چې د لیسز مخلوط او/یا ایتانول اضافه سوپرناټینټ دمخه 37 ته ګرم شوی و°C.
هیڅ RNA استخراج شوی یا د RNA حاصل کم دی
معمولا ډیری فکتورونه شتون لري چې د بیا رغونې موثریت اغیزه کوي، لکه: نمونه د RNA منځپانګې، د عملیاتو طریقه، د ایولوشن حجم، او داسې نور.
د عامو لاملونو تحلیل په لاندې ډول:
1. د یخ حمام یا ټیټ تودوخې (4 درجې C) سینټرفیوګریشن د عملیاتو په جریان کې ترسره شو.
وړاندیز: د خونې په حرارت کې کار وکړئ (15-25°C) په ټوله پروسه کې، د یخ حمام او د ټیټ تودوخې سنټرفیوګریشن مه کوئ.
2. RNA د نمونې د ناسمې ساتنې یا د نمونې د اوږدې مودې ساتنې له امله تخریب شوی.
سپارښتنه: تازه راټول شوي نمونې باید ژر تر ژره په مایع نایتروجن کې کنګل شي، او بیا د اوږدې مودې لپاره په -80 ° C کې زیرمه شي، د نمونو د تکرار او یخولو څخه ډډه وکړئ؛یا سمدلاسه نمونې د RNA سټیبلائزر RNAlater محلول (حیواناتو نمونې) کې ډوب کړئ.
3. ناکافي نمونې ټوټې کول او لیسز د پاکولو کالم د بندیدو لامل کیږي.
وړاندیز: کله چې نسج پیس کړئ، مهرباني وکړئ ډاډ ترلاسه کړئ چې نسج په کافي اندازه ځمکه ده، او ژر تر ژره یې مخکې چمتو شوي بفر PSL1 ته انتقال کړئ (تایید کړئ چې د β-ME سمه تناسب اضافه شوی، د طرزالعمل 1 ګام وګورئ).
4. په غلطه توګه الیونټ اضافه شوی.
وړاندیز: ډاډ ترلاسه کړئ چې RNase-Free ddH2O د پاکولو کالم جھلی په مینځ کې ډوب شوی.
5. د مطلق ایتانول صحیح حجم په بفر PSL2 یا بفر PRW2 کې ندی اضافه شوی.
وړاندیز: مهرباني وکړئ لارښوونې تعقیب کړئ، د بفر PSL2 او بفر PRW2 کې د مطلق ایتانول صحیح حجم اضافه کړئ او د کټ کارولو دمخه ښه مخلوط کړئ.
6. د نسج نمونې اندازه نامناسب ده.
وړاندیز: د بفر PSL1 په هر 500 μl کې 50 ملی ګرامه نسج وکاروئ.د ډیرو نسجونو کارول به د استخراج شوي RNA مقدار کم کړي او د RNA په پایله کې پاکوالی به هم کم شي.موږ په کلکه سپارښتنه کوو چې د لومړني نمونې دوز باید په هر RNA استخراج عملیاتو کې له 50 ملی ګرام څخه ډیر نه وي.
7. نامناسب اخراج حجم یا نامکمل اخراج.
وړاندیز: د پاکولو کالم الیونټ حجم 50-200 μl دی؛که چیرې د elution اغیز د قناعت وړ نه وي، نو سپارښتنه کیږي چې د خونې په حرارت کې وخت وغځول شي وروسته له دې چې مخکې ګرم شوي RNase-Free ddH2O اضافه کړئ، لکه 5-10min.
8. د پاکولو کالم د BufferPRW2 سره مینځل وروسته د ایتانول پاتې شوني لري.
وړاندیز: که خالي ټیوب د 1 دقیقو لپاره سینټرفیوګ شي او په بفر PRW2 کې د مینځلو وروسته لاهم ایتانول پاتې وي ، تاسو کولی شئ د خالي ټیوب سینټرفیوګریشن وخت 2 دقیقو ته لوړ کړئ ، یا د پاکولو کالم د 5 دقیقو لپاره د خونې په حرارت درجه کې ځای په ځای کړئ ترڅو پاتې ایتانول په بشپړ ډول لرې شي.
9. کټ په غلطه توګه کارول شوی.
وړاندیز: د پولیفینولیک پولی سیکرایډونو د نبات نمونو لپاره، د عام کټونو کارول لکه د نبات ټول RNA جلا کولو کټ ممکن د مثالي RNA نمونې ترلاسه کولو توان ونلري.موږ تاسو ته وړاندیز کوو چې د Plant Total RNA IsolationKit Plus وکاروئ ، کوم چې په ځانګړي ډول د پولیفینول پولیساکریډ نبات نمونو لپاره ډیزاین شوی.یو کټ په ځانګړي ډول د پولیفینول او پولیساکریډ نبات نمونو څخه د RNA استخراج لپاره رامینځته شوی.
د OD260/OD280 ارزښت ټیټ دی
د ddH2O سره RNA elution او د سپیکٹرو فوټومیټر لوستلو لپاره کارول د OD260/OD280 ټیټ ارزښتونو پایله لري.موږ وړاندیز کوو چې د 10 mm Tris-HCl، pH 7.5 (د RNA د پاکولو لپاره د RNase-Free ddH2O پرځای) د نسبتا درست OD260/OD280 ارزښتونو ترلاسه کولو لپاره، په 19 پاڼه کې "RNA غلظت او پاکولو ارزونه" وګورئ.
پاک شوی RNA تخریب شوی
د پاک شوي RNA کیفیت په فکتورونو پورې اړه لري لکه د نمونې ساتنه، د RNase ککړتیا، او لاسوهنه.
د عامو لاملونو تحلیل:
1. د نسجونو نمونې د راټولولو وروسته په وخت کې زیرمه شوي ندي.
سپارښتنه: که د نسجونو نمونې د راټولولو وروسته په وخت کې ونه کارول شي، مهرباني وکړئ سمدلاسه یې په مایع نایټروجن کې په ټیټ حرارت کې ذخیره کړئ یا په مایع نایتروجن کې د چټک کنګل کیدو وروسته د اوږدې مودې ذخیره کولو لپاره -80 ° C ته انتقال کړئ، یا سمدلاسه نمونې د RNA سټیبلائزر RNAlater محلول (حیواناتو نمونې) کې ډوب کړئ.د RNA استخراج لپاره، هڅه وکړئ چې د تازه راټول شوي نسج نمونې وکاروئ.
2. د نسجونو د نمونو تکرار او یخ کول.
وړاندیز: کله چې د نسجونو نمونې ذخیره کړئ، دا غوره ده چې د ساتنې لپاره یې په کوچنیو ټوټو وویشئ، او د کارولو په وخت کې یې یوه برخه واخلئ ترڅو د نمونو د بار بار یخولو او پړسوب له امله د RNA تخریب مخه ونیول شي.
3.RNase د عملیاتو په خونه کې معرفي کیږي یا نه اغوستل کیدونکي دستکشې ، ماسکونه او داسې نور.
وړاندیز: د RNA استخراج تجربې په جلا RNA عملیاتو کې غوره ترسره کیږي ، او د لابراتوار میز باید د تجربې دمخه پاک شي ، او د تجربې په جریان کې د ضایع کیدو وړ دستکشې او ماسکونه باید اغوستل شي ترڅو د RNA تخریب مخه ونیول شي چې د RNase معرفي کیدو له امله رامینځته کیږي.
4. ریجنټ د کارولو پرمهال د RNase لخوا ککړ شوی.
وړاندیز: د اړوندو تجربو لپاره د نبات ټول RNA استخراج کټونو نوې لړۍ سره بدل کړئ.
5. د سینټرفیوج ټیوبونه او پایپټ لارښوونې چې د RNA لاسوهنې لپاره کارول کیږي د RNase سره ککړ شوي دي.
وړاندیز: ډاډ ترلاسه کړئ چې د سینټرفیوج ټیوبونه، د پایپټ لارښوونې، پایپټ او نور د RNA استخراج کې کارول کیږي ټول د RNase څخه پاک دي.
لارښود لارښود:
د نبات ټول RNA جلا کولو کټ پلس لارښود لارښود
