د PCR عکس العمل د پام وړ ځانګړتیا د دې لوی ظرفیت او خورا لوړ حساسیت دی.د PCR فعالیت او کشف موثریت ته وده ورکولو لپاره، موږ د PCR پراخولو ظرفیت او د کشف حساسیت ښه کولو ته ژمن یو، مګر سر درد د تجربې په بهیر کې دی.غلط مثبت اکثرا واقع کیږي، او د نمونې کراس ککړتیا یا د PCR محصول ککړتیا ډیره لږه اندازه کیدای شي په تجربه کې د غلط مثبتو لامل شي.
د PCR محصولاتو ککړتیا پنځه ډوله
د PCR د ککړتیا لپاره ډیری دلیلونه شتون لري، کوم چې په نږدې ډول په لاندې کټګوریو ویشل کیدی شي:
د نمونې ککړتیا په عمده ډول د نمونې راټولولو لپاره د کانټینر د ککړتیا له امله رامینځته کیږي ، یا کله چې نمونه ځای په ځای شي ، دا د نرم مهر کولو له امله له کانټینر څخه بهر کیږي ، یا نمونه د کانټینر بهر ته ایښودل کیږي ، کوم چې د کراس ککړتیا لامل کیږي؛ککړتیا د نمونو تر مینځ د ککړتیا لامل کیږي؛ځینې مایکروبیل نمونې، په ځانګړې توګه ویروسونه، کولی شي د ایروسول سره خپریږي یا ایروسول جوړوي، چې د متقابل ککړتیا سبب کیږي.
اصلي دلیل یې دا دی چې د PCR ریجنټونو چمتو کولو پرمهال ، د نمونې ټوپک ، کانټینر ، ډبل ډیسټل اوبه او نور محلولونه د PCR نیوکلیک اسید ټیمپلیټ لخوا ککړ شوي.
د مالیکول بیولوژی لابراتوارونو او ځینې لابراتوارونو کې چې کلون شوي پلازمیډونه د مثبت کنټرول په توګه کاروي ، د کلون شوي پلازمیډ ککړتیا ستونزه هم عامه ده.ځکه چې د واحد په حجم کې د کلونینګ پلاسمیډ مواد خورا لوړ دي، او د پاکولو په پروسه کې ډیرو وسیلو او ریجنټونو ته اړتیا لیدل کیږي، او په ژوندیو حجرو کې پلاسمیډ د ژوندی حجرو د قوي ودې او بیا تولید وړتیا له امله د ککړتیا احتمال لري.
د پراخ شوي محصولاتو ککړتیا د PCR عکس العملونو کې ترټولو عام ککړتیا ستونزه ده.ځکه چې د PCR محصول د کاپي مقدار لوی دی (عموما 1013 کاپي/ml)، کوم چې د PCR کشف کولو کاپي شمیرې له حد څخه خورا لوړ دی، د PCR محصولاتو ککړتیا ډیره لږه اندازه کولی شي د غلط مثبتو لامل شي.
د ایروسول ککړتیا د PCR محصولاتو ککړتیا ترټولو احتمالي بڼه ده، او دا هم تر ټولو اسانه ده چې سترګې پټې شي.دا د مایع سطح او هوا تر مینځ د رګونو له امله رامینځته کیږي.عموما، د ایروسول ککړتیا هغه وخت رامینځته کیدی شي کله چې پوښ خلاص شي ، کله چې نمونه جذب شي ، یا حتی کله چې د عکس العمل ټیوب په قوي ډول ولړزول شي.د محاسبې له مخې، د ایروسول ذره کولی شي 48,000 کاپي ولري، نو د دې له امله رامینځته شوي ککړتیا یوه ستونزه ده چې د ځانګړې پاملرنې وړ ده.
په ځانګړې توګه، د ازموینې لابراتوارونه اکثرا د یو ځانګړي جین ازموینې لپاره ورته جوړه پریمر کاروي.د وخت په تیریدو سره ، د PCR محصولاتو لوی مقدار به د لابراتوار ځای کې پیښ شي.کله چې دا ډول ککړتیا رامنځته شي، نو په لنډ وخت کې یې له منځه وړل ستونزمن کار دی.
د ککړتیا د لومړیو دریو ډولونو لپاره، موږ کولی شو د مخنیوي لپاره اغیزمنې لارې وکاروو، مګر د PCR محصولاتو له امله رامینځته شوي ککړتیا مخنیوی ستونزمن دی، په ځانګړې توګه د غیر معیاري PCR لابراتوارونو په جوړولو کې.د PCR په پروسه کې، کله چې د پایپټ ټیپ مایع وخوري او وخوري، او د PCR ټیوب پوښ خلاص شي، یو ایروسول به جوړ شي.د DNA مالیکولونه چې د ایروسول لخوا لیږدول کیږي (یو ایروسول کولی شي لسګونه زره DNA لیږدوي) له مینځه وړل ستونزمن دي ځکه چې دوی په هوا کې تیریږي.یوځل چې د PCR تجربو بل پړاو معرفي شي ، غلط مثبت به په لازمي ډول پیښ شي.
لکه څنګه چې په لاندې شکل کې ښودل شوي، منفي کنټرول د ګټو اړونده ډله هم پراخه کړه:
د PCR د ککړتیا او مخنیوي د دې مسلې لومړۍ برخه دلته معرفي شوې.راتلونکې ګڼه به تاسو ته دوهمه برخه "د PCR محصولاتو ککړتیا مخنیوی" راوړي، نو په دې اړه پاتې شئ!
د پوسټ وخت: جولای-25-2017
