مستقیم PCR یو عکس العمل دی چې په مستقیم ډول د حیواناتو یا نبات نسجونه د نیوکلیک اسید استخراج پرته د لوړولو لپاره کاروي.په ډیری لارو کې، مستقیم PCR د منظم PCR په څیر کار کوي

اصلي توپیر هغه دودیز بفر دی چې په مستقیم PCR کې کارول کیږي، نمونه د نیوکلیک اسید استخراج پرته مستقیم د PCR عکس العمل تابع کیدی شي، مګر د انزایمونو زغم او د مستقیم PCR غبرګون کې د بفر مطابقت لپاره ورته اړتیاوې شتون لري.

که څه هم په عام نمونو کې لږ یا لږ PCR مخنیوی کونکي شتون لري، مستقیم PCR لاهم کولی شي د انزایمونو او بفرونو د عمل لاندې د اعتبار وړ پراخوالی ترلاسه کړي.دودیز PCR عکس العمل د نمونې په توګه د لوړ کیفیت نیوکلیک اسید ته اړتیا لري ، کوم چې کولی شي د PCR عکس العمل د اسانه پرمختګ مخه ونیسي که چیرې ټیمپلیټ پروټینونه او نور نجاستونه ولري.مستقیم PCR اوس مهال د مالیکولر تشخیص په برخه کې یو له خورا مشهور ټیکنالوژیو څخه دی.

01 مستقیم PCR په اصل کې د څارویو او نباتاتو لپاره کارول کیده

د مستقیم PCR لومړنی غوښتنلیک د حیواناتو او نباتاتو په برخه کې دی، لکه د موږک وینه، نسج او ویښتان، پیشو، چرګ، خرگوش، پسه، غوا، او نور، د نبات پاڼې او تخمونه، او داسې نور، د جین ټایپ کولو مطالعې لپاره کارول کیږي، ټرانسجنیک، پلاسمید کشف، د جین ناک آوټ سرچینې، د پیژندنې ساحه، SNA پیژندنه، د پیژندنې ساحه، د پیژندنې شننه. s.

دا ساحې یو څه عام ځانګړتیاوې لري، دا د هدف جین مینځپانګه نسبتا لوړه ده او د نیوکلیک اسید استخراج ستونزمن دی، نو مستقیم PCR نه یوازې وخت خوندي کوي او په پایلو لږ اغیزه لري، بلکې لګښت هم خوندي کوي.

مستقیم PCR د رنځجن کشف لپاره کارول کیږي د وروستیو کلونو مسله ده ، ځینې PCR ریجنټ جوړونکو پدې لار کې ډیرې هڅې کړې کله چې نوښت رامینځته کوي.په ځانګړي توګه د COVID-19 په دې ناروغۍ کې ، ډیری ورته کشف محصولات په بازار کې راڅرګند شوي ، لکه د SARS-CoV-2 نیوکلیک اسید کشف کټ (ملټيپلیکس PCR فلوروسینټ تفتیش میتود) چې د فارجین لخوا څیړل شوی او رامینځته شوی ، کوم چې د ریښتیني وخت RT PCR ټیکنالوژي (rRT-PCR) د کیفیت لرونکي اسیدونو کشف کولو لپاره کاروي. oropharyngeal swab نمونې.

Foregene یو له هغو شرکتونو څخه دی چې د مستقیم PCR ټیکنالوژۍ کاروي، د نورمال ORF1ab، N، E، او د کشف لپاره.ډول نسب نیوکلیک اسیدونه د انسان په ناسوفرینجیل یا اوروفرینجیل سویب نمونو کې لکه SARS-CoV-2 B.1.1.7 نسب (UK)، B.1.351 نسب (ZA)، B.1.617 نسب (IND) او P.1 نسب (BR).

02  د مستقیم PCR لپاره ریجنټونه اړین دي

نمونه Lysate

نمونه لیسټیټ د خپل ځان لخوا تنظیم کیدی شي یا پیرود کیدی شي.د لیسټیټ مختلف برانڈونو ترکیب کې توپیر به د لیز کولو وړتیا توپیر وکړي ، او بیا د لیز کولو وخت به یو څه توپیر ولري.د بیلګې په توګه، د څارویو د نسجونو نمونو چمتو کولو لپاره، 30 دقیقې یا د شپې لیسز په عمومي توګه سپارښتنه کیږي، او د ویروسونو لپاره د لیسز حل د 3-10 دقیقو پورې وي.

د PCR ماسټر مخلوط

دا سپارښتنه کیږي چې د هاټ سټارټ DNA پولیمیریز وکاروئ ترڅو ځانګړي امپلیفیکیشن ته وده ورکړي او د امپلیفیکیشن وړتیا زیاته کړي.د مستقیم PCR اصلي برخه یو ډیر زغمونکی پولیمیریز دی.

په نمونه کې د اجزاو له منځه وړل یا منع کول چې د DNA امپلیفیکیشن اغیزه کوي

وروسته لدې چې نمونه د لیسیټ سره پروسس شي ، پروټینونه ، لیپیډونه او نور حجرې کثافات به خوشې شي ، دا مواد به د PCR عکس العمل مخه ونیسي.له همدې امله ، مستقیم PCR د دې فاکتورونو نفوذ کمولو لپاره د ورته لرې کولو یا مخنیوی کونکو اضافه کولو ته اړتیا لري.

03  د مستقیم PCR د پنځو پوهه ټکو ټولګه

لومړی، مستقیم PCR ټیکنالوژي د مختلف بیولوژیکي نمونو لپاره مستقیم PCR ټیکنالوژي ده.د دې تخنیکي حالت لاندې، د نیوکلیک اسید جلا کولو او استخراج کولو ته اړتیا نشته، په مستقیم ډول د نسج نمونه د اعتراض په توګه وکاروئ، او د PCR عکس العمل ترسره کولو لپاره د هدف جین پرائمر اضافه کړئ.

دوهم، مستقیم PCR ټیکنالوژي نه یوازې د دودیز DNA ټیمپلیټ امپلیفیکیشن ټیکنالوژي ده ، بلکه د RNA ټیمپلیټ ریورس ټرانسکرپشن PCR هم پکې شامل دي.

دریم، د مستقیم PCR ټیکنالوژي نه یوازې په مستقیم ډول د نسجونو نمونو کې د معمول کیفیتي PCR تعاملات ترسره کوي، بلکې د ریښتیني وخت qPCR تعاملات هم شامل دي، کوم چې د غبرګون سیسټم ته اړتیا لري ترڅو د شالید ضد فلوروسینس مداخلې وړتیا ولري او د انډروجینس فلوروسینس ضد وړتیا قوی شي.

څلورم، هغه نمونې چې د مستقیم PCR ټیکنالوژۍ لخوا په نښه شوي یوازې د نیوکلیک اسید ټیمپلیټونو خوشې کولو ته اړتیا لري، او پروټینونه، پولیساکریډز، مالګې ایونونه او نور نه لرې کوي چې د PCR غبرګون سره مداخله کوي.کوم چې د عکس العمل سیسټم کې د نیوکلیک اسید پولیمیریز او PCR مکس ته اړتیا لري ترڅو غوره مقاومت او موافقت ولري ترڅو د پیچلو شرایطو لاندې د انزایم فعالیت او د نقل دقت ډاډ ترلاسه کړي.

پنځم، د نسج نمونه د مستقیم PCR ټیکنالوژۍ لخوا په نښه شوي پرته له کوم نیوکلیک اسید بډایه کولو درملنې او د ټیمپلیټ اندازه خورا لږه ده، کوم چې د غبرګون سیسټم ته اړتیا لري چې خورا لوړ حساسیت او د لوړولو وړتیا ولري.