لاندې د احتمالي ستونزو تحلیلبکلswab/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

د پاکولو کالم تړل شوی دی

په دې کټ کې، د جینومیک DNA استخراج په عملیاتو کې، د پاکولو کالم په مستقیم ډول د نمونې انزیماتیک لیسیز مخلوط کې پرته له سینټرفیوګریشن مرحلې څخه جذب کیږي، او د پاکولو کالم ممکن د نمونې د انزایمیزیشن او لوړ ویسکوسیت له امله بند شي.

لاندې احتمالي لاملونه په لاندې ډول دي:

1. د نسجونو د نمونو نیمګړی انزیماتیک هضم.

سپارښتنه: د Foregene Protease نمونې پروسس کولو وخت په مناسب ډول وغځول شي یا سوپرناټینټ په 12,000 rpm (~ 13,400) کې د سینټرفیوګریشن وروسته واخیستل شي× g) د 5 دقیقو لپاره.

2. د نسجونو نمونو یا لوی نسجونو ډیر کارول.

سپارښتنه: دا غوره ده چې له 1 څخه ډیر نه ويبکل په نمونه کې swab؛که نمونه ډیره لویه وي، د Buffer ST1، Foregene Protease، buffer ST2 مطابق دوز زیات کړئ.

3. د نمونې viscosity ډیر لوړ دی.

سپارښتنه: نمونې د جینومیک DNA استخراج دمخه د 10 mM Tris-HCl سره په مناسبه توګه حل کیدی شي.

4. د وینې کارت ټوټې ټوټې شوې.

سپارښتنه: د وینې د ځای (FTA کارت) جینومیک استخراج د 6 مرحلې انتقالي سنټرفیوګریشن وخت په مناسب ډول وغځول شي.

ټیټ حاصل یا هیڅ DNA

ډیری وختونه ډیری فاکتورونه شتون لري چې د جینومیک DNA حاصل اغیزه کوي، پشمول د نمونې اصل، د نمونې ذخیره کولو شرایط، د نمونې چمتو کول، لاسوهنه، او نور.

جینومیک DNA د استخراج پرمهال نشي ترلاسه کیدی

احتمالي لاملونه په لاندې ډول دي:

1. د نمونو ناسم ساتل یا د ډیر وخت لپاره ذخیره کول د جینومیک DNA تخریب لامل کیږي.

سپارښتنه: د خولې سویبونه باید په غوره توګه تازه نمونه شي، او دا مشوره نه کیږي چې د جینومیک DNA استخراج عملیاتو لپاره ساتل شوي سویبونه وکاروئ؛د وینې ځای نمونې باید ډاډ ترلاسه کړي چې کیفیت وړ دی او د ذخیره کولو وخت باید ډیر اوږد نه وي.

2. د نسج ډیر لږ کارول ممکن د اړونده جینومیک DNA د استخراج لامل نشي.

سپارښتنه: تعقیب کړئبکسهl د عملیاتو په لارښود کې د نمونې اخیستلو لارښوونې، او څومره چې امکان لري مسح کړئ ترڅو کافي حجرې د جینومیک DNA استخراج لپاره د شفاهي سویب سره وصل شي؛د وینې د ځای نمونې استخراج لپاره، د وینې د ځای قطع کولو ساحه په مناسبه توګه لوړه کیدی شي.

3. Foregene Protease په ناسمه توګه ساتل کیږي، چې په پایله کې یې فعالیت کمیږي یا غیر فعال کیږي.

سپارښتنه: د ذخیره کولو شرایط تایید کړئایفoregene Protease یا د انزایمیک عکس العمل لپاره د نوي Foregene Protease سره بدل کړئ.

4. د کټ ناسم ساتنه یا د ذخیره کولو وخت ډیر اوږد دی، چې په پایله کې د کټ ځینې برخې ناکامیږي.

سپارښتنه: یو نوی پیرودبکل swab DNAانزوا د اړونده پروسیجرونو لپاره کټ.

5. بفر WB مطلق ایتانول نه اضافه کوي.

سپارښتنه: تایید کړئ چې بفر WB د مطلق ایتانول صحیح حجم اضافه کوي.

6. په سیلیکون فلم کې ایلوینټ په سمه توګه نه دی اضافه شوی.

سپارښتنه: 65 اضافه کړئ°Cمخکې ګرم شوی ایلوینټ د سیلیکون غشا مینځ ته راښکته کیږي او د خونې په حرارت کې د 5 دقیقو لپاره پریږدئ ترڅو د elution موثریت زیات کړي.

Lاو د جینومیک DNA حاصل ورکوي جلا شوی

لاندې احتمالي لاملونه په لاندې ډول دي:

1. د نمونو ناسم ساتل یا د ډیر وخت لپاره ذخیره کول د جینومیک DNA تخریب لامل کیږي.

سپارښتنه: د اورل سویبونه په غوره توګه تازه نمونه شوي، او ساتل شوي سویبونه باید د جینومیک DNA استخراج لپاره ونه کارول شي.

2. که چیرې د نسج نمونې اندازه ډیره لږه وي، استخراج شوي جینومیک DNA مواد به لږ وي.

سپارښتنه: په عملیاتي لارښود کې د شفاهي سویب نمونې لارښوونې تعقیب کړئ، څومره چې امکان ولري مسح کړئ ترڅو کافي حجرې د جینومیک DNA استخراج لپاره د شفاهي سویب سره وصل شي.

3. Foregene Protease په ناسمه توګه ساتل کیږي، چې په پایله کې یې فعالیت کمیږي یا غیر فعال کیږي.

سپارښتنه: د ذخیره کولو شرایط تایید کړئthe Fاوریګین پروټیز یا د نوي سره بدل کړئ د انزایمیک عکس العمل لپاره فارجین پروټیز.

4. د الکولو ستونزې.

سپارښتنه: د elution لپاره Buffer EB وکاروئ؛که چیرې ddH کاروئ₂O یا نور eluents، تایید کړئ چې د eluate pH د 7.0-8.5 ترمنځ دی.

5. eluate په سمه توګه د dropwise نه اضافه کیږي.

سپارښتنه: د سیلیکون جھلی په مینځ کې د ایلیونټ څاڅکي اضافه کړئ او د خونې په حرارت کې د 5 دقیقو لپاره پریږدئ ترڅو د elution موثریت زیات شي.

6. د elution مایع ډیر لږ جمع کیږي.

سپارښتنه: د جینومیک DNA elution لپاره eluent وکاروئ لکه څنګه چې په لارښوونو کې اړین دي، لږترلږهلږ نه د 15 څخهμl.

Lاو پاکوالي of جینومیک DNAجلا شوی

د جینومیک DNA ټیټ پاکوالی کولی شي د لاندې جریان تجربو ناکامي یا نا رضایتي پایلې رامینځته کړي ، لکه: انزایمونه نشي خلاصیدلی ، PCR نشي کولی د ګټو جین ټوټه ترلاسه کړي ، او داسې نور.

احتمالي لاملونه په لاندې ډول دي:

1. د هیټروپروټین ککړتیا، د RNA ککړتیا.

تحلیل: د پاکولو کالم د بفر PW په کارولو سره نه مینځل شوی؛د بفر PW واش پاکولو کالم د سم سنټرفیوګل سرعت په کارولو سره نه و مینځل شوی.

سپارښتنه: ډاډ ترلاسه کړئ چې د ایتانول اضافه کولو دمخه په سپرناټینټ کې باران شتون نلري؛ډاډ ترلاسه کړئ چې د لارښوونو سره سم د پاکولو کالم ومینځئ، او دا مرحله نشي پریښودل کیدی.

2. د ناپاکۍ آیون ککړتیا.

تحلیل: د بفر WB د مینځلو پاکولو کالم یوازې یو ځل پریښودل شوی یا مینځل شوی ، په پایله کې د پاتې ionic ککړتیا لامل کیږي.

سپارښتنه: ډاډه اوسئ چې د بفر WB 2 ځله ومینځئ لکه څنګه چې د امکان تر حده د پاتې ایونونو لرې کولو لپاره لارښود شوی.

3. د RNA انزایم ککړتیا.

تحلیل: بهرني RNases بفر ته اضافه شوي؛د بفر PW واش عملیات غلط وو، د RNase پاتې شونو په پایله کې، د لاندې جریان RNA تجربوي عملیات، لکه د ویټرو لیږد په اړه اغیزه کوي.

سپارښتنه: د فارجین لړۍ نیوکلیک اسیدisolation کټونه کولی شي د RNase اضافي اضافه کولو پرته RNA لرې کړي ،په دې توګه buccal Swab/FTA کارت DNA Isolation Kitاړتیا't RNase اضافه کړئ؛ډاډ ترلاسه کړئ چې د بفر PW مینځلو پاکولو کالم لپاره لارښوونې تعقیب کړئ، او دا مرحله نشي پریښودل کیدی.

4. د ایتانول پاتې شوني.

تحلیل: بفر WB د پاکولو کالم مینځلو وروسته خالي ټیوب سینټرفیوګریشن نه دی ترسره کړی.

سپارښتنه: د لارښوونو سره سم د خالي ټیوب سینټرفیوګریشن عملیات ترسره کړئ.

5. نورې ناپاکۍ ککړتیا.

تحلیل: خوندي شوي نمونې یا ځانګړي نمونې مخکې له مخکې درملنه نه کیږي.

سپارښتنه: د لارښوونې سره سم نمونه په بشپړه توګه پریټریټ کړئ.