د اوریدلو ضایع (HL) په انسانانو کې ترټولو عام حسي معلولیت ناروغي ده.په پرمختللو هیوادونو کې، په ماشومانو کې نږدې 80٪ د زباني کاڼۍ پیښې د جینیاتي عواملو له امله رامینځته کیږي.تر ټولو عام د واحد جین نیمګړتیاوې دي (لکه څنګه چې په 1 شکل کې ښودل شوي)، 124 جین بدلونونه موندل شوي چې په انسانانو کې د غیر سنډرومیک اوریدنې له لاسه ورکولو سره تړاو لري، پاتې نور یې د چاپیریال عوامل دي.د کوکلیر امپلانټ (یو بریښنایی وسیله چې په داخلي غوږ کې ایښودل کیږي چې مستقیم د اوریدونکي اعصابو ته بریښنایی محرک چمتو کوي) د شدید HL درملنې لپاره خورا مؤثره انتخاب دی ، پداسې حال کې چې د اوریدلو مرسته (یو بهرنۍ بریښنایی وسیله چې د غږ څپې بدلوي او پراخوي) کولی شي د معتدل HL ناروغانو سره مرسته وکړي.په هرصورت، اوس مهال هیڅ ډول درمل شتون نلري چې د میراثي HL (GHL) درملنه وکړي.په وروستیو کلونو کې، د جین درملنه د داخلي غوږ د ناروغۍ درملنې لپاره د ژمنې طریقې په توګه د پام وړ پاملرنه ترلاسه کړې.
انځور1.د کوڼوالي سره تړلي توپیر ډول ویشل.[1]
په دې وروستیو کې، د سالک انسټیټیوټ او د شیفیلډ پوهنتون ساینس پوهانو د مالیکولر درملنې - میتودونو او کلینیکي پراختیا [2] په برخه کې د څیړنې پایله خپره کړه، کوم چې د موروثي کوڼۍ د ویوو جین درملنې لپاره د پراخه غوښتنلیک امکانات وښودل.اوري مانور، د سالک انسټیټیوټ د څیړنې معاون پروفیسور او د پرمختللو بایوفوټونیک لپاره د ویټ مرکز رییس وویل، هغه د اوریدلو له سخت زیان سره زیږیدلی او احساس کوي چې د اوریدلو بیا رغونه به یو ښه ډالۍ وي.د هغه پخوانۍ څیړنې وموندله چې Eps8 د ایکټین پابند او کیپینګ فعالیتونو سره د عمل تنظیم کونکي پروټین دی.د cochlear ویښتو په حجرو کې، د پروټین کمپلیکس چې د Eps8 لخوا د MYO15A، WHIRLIN، GPSM2 او GNAI3 سره جوړ شوی په عمده توګه د اوږدې سټیریوسیلیا په لارښوونو کې شتون لري، کوم چې د MYO15A سره یوځای د لنډ سټیریوسیلیا په لارښوونو کې BAIAP2L2 ځایی کوي، د ویښتو د ساتلو لپاره اړین دي.نو ځکه، Eps8 کولی شي د ویښتو حجرو د سټیریوسیلیا اوږدوالی تنظیم کړي، کوم چې د نورمال اوریدلو فعالیت لپاره اړین دی؛د Eps8 ړنګول یا بدلون به د لنډ سټیریوسیلیا لامل شي، کوم چې دا نشي کولی په سمه توګه د دماغ د لید لپاره په بریښنایی سیګنالونو کې غږ بدل کړي، چې په پایله کې د کاڼه کیدو لامل کیږي..په ورته وخت کې، همکار والټر مارکوټي، د شیفیلډ پوهنتون پروفیسور، وموندله چې د ویښتو حجرې د Eps8 په نشتوالي کې په نورمال ډول وده نشي کولی.په دې څیړنه کې، منور او مارکوټي سره یوځای شوي ترڅو تحقیق وکړي چې ایا د سټیریوسیلیري حجرو لپاره د Eps8 اضافه کول کولی شي خپل فعالیت بیرته راولي او په پایله کې، په موږکانو کې اوریدل ښه کړي.د څیړنې ټیم د ایډینو سره تړلي ویروس (AAV) ویکتور Anc80L65 کارولی ترڅو د کوډ کولو ترتیب چې وحشي ډول EPS8 لري د Eps8-/- نوي زیږیدلي P1-P2 موږکانو ته د ګردي کړکۍ جھلی انجیکشن په واسطه وړاندې کړي.د موږک کوکلیر ویښتو حجرو کې د سټیریوسیلیا فعالیت مخکې له دې چې دوی بالغ شي ترمیم شوي.او د ترمیم اغیز د امیجنگ ټیکنالوژۍ او د سټیریوسیلیا اندازه کولو لخوا مشخص شوی و.پایلو ښودلې چې Eps8 د سټیریوسیلیا اوږدوالی زیات کړی او په ټیټ فریکونسۍ حجرو کې د ویښتو حجرو فعالیت بحال کړی.دوی دا هم وموندله چې د وخت په تیریدو سره داسې ښکاري چې حجرې د دې جین درملنې لخوا د ژغورلو وړتیا له لاسه ورکوي.پایله یې دا ده چې دا درملنه ممکن په رحم کې اداره کولو ته اړتیا ولري، ځکه چې Eps8-/- د ویښتو حجرې ممکن د موږکانو له زیږون وروسته د ترمیم څخه بهر پاخه شوي یا راټول شوي زیانونه راټول کړي.منور وویل: "Eps8 یو پروټین دی چې ډیری مختلف دندې لري، او لاهم د سپړلو لپاره ډیر څه شتون لري." منور وویل.راتلونکې څیړنه به په بیلابیلو پرمختیایي مرحلو کې د اوریدلو په بیا رغولو کې د Eps8 جین درملنې اغیزې پلټنه وکړي، او ایا دا ممکن وي چې د درملنې فرصتونه اوږد کړي.په تصادفي توګه، د نومبر په 2020 کې، په اسراییل کې د تل ابیب پوهنتون پروفیسور کیرن بی ابراهام خپلې پایلې د EMBO مالیکولر درمل په ژورنال کې خپرې کړې، د جین درملنې ټیکنالوژۍ په کارولو سره د بې ضرر مصنوعي اډینو پورې تړلي ویروس AAV9-PHP رامینځته کولو لپاره.ب، د Syne4-/- موږکانو د ویښتو په حجرو کې د جین نیمګړتیا د موږکانو داخلي غوږ ته د Syne4 د کوډ کولو ترتیب لیږدونکي ویروس په انجیکولو سره رغول شوي، دا اجازه ورکوي چې د ویښتو حجرو ته ننوځي او لیږدول شوي جینیاتي مواد خوشې کړي، دوی ته اجازه ورکوي چې بالغ شي او په نورمال ډول فعالیت وکړي (لکه په 2 شکل کې).
انځور2.د داخلي غوږ اناتومي سکیمیک نمایش، د کورټي ارګان او د نیسپرین -4 حجرو فعالیت باندې تمرکز سره.
دا لیدل کیدی شي چې د جین درملنې کارول د جین په کچه د موروثي ناروغیو درملنې هدف ته د رسیدو لپاره د درملنې لپاره د بدل شوي جینونو په داخلولو ، لرې کولو یا سمولو سره (یعنې په ناروغۍ کې د جینیاتي بدلونونو کنټرول) لوړ کلینیکي اغیز لري.د غوښتنلیک امکانات.د جینیکي پلوه کمبود لپاره د جین درملنې اوسني میتودونه په لاندې کټګوریو ویشل کیدی شي:
د جین بدلول
د جین بدلول په حقیقت کې د جین درملنې ترټولو "مستقیم" بڼه ده، د جین د نورمال یا وحشي ډوله کاپي سره د نیمګړتیا جین پیژندلو او بدلولو پراساس.د غوږ د لاسه ورکولو لپاره د داخلي غوږ جین درملنې لومړنۍ بریالۍ مطالعه چې د ویسکولر ګلوټامیټ ټرانسپورټر 3 (VGLUT3) جین له مینځه وړو له امله رامینځته کیږي؛د AAV1 منځګړیتوب د داخلي غوږ ویښتو حجرو (IHCs) کې د خارجي VGLUT3 اوور ایکسپریشن تحویلي کولی شي د اوریدلو دوامداره رغیدو ، د جزوي ربن سیناپټیک مورفولوژي رغونه ، او اختلال غبرګون لامل شي [4].په هرصورت، په مثالونو کې د AAV لخوا ورکړل شوي دوه جین بدلولو په شمول چې پورته معرفي کې تشریح شوي، دا مهمه ده چې یادونه وکړو چې د موږک ماډلونه د ځینې ډولونو جین حذف کولو میراثي اوریدلو ضایعاتو لپاره کارول کیږي په موقتي ډول د انسانانو څخه توپیر لري، او په P1 موږک کې، داخلي غوږ د پراختیا په مرحله کې دی.برعکس، انسانان د بالغ داخلي غوږ سره زیږیدلی.دا توپیر د انسان د میراثي کاڼۍ اختلالاتو درملنې لپاره د موږک پایلو احتمالي پلي کیدو مخه نیسي پرته لدې چې د بالغ موږک غوږونو ته د جین درملنه ورکړل شي.
د جین ترمیم: CRISPR/Cas9
د "جین بدلولو" سره پرتله کول، د جین ترمیم ټیکنالوژۍ پراختیا له ریښې څخه د جینیاتي ناروغیو درملنه پیل کړې.په مهمه توګه، د جین ترمیم طریقه د دودیزو overexpression جین درملنې میتودونو نیمګړتیاوې رامینځته کوي کوم چې د غالب میراثي کاڼه ناروغیو لپاره مناسب ندي، او هغه ستونزه چې د overexpression میتود اوږدمهاله نه وي.وروسته له دې چې چینايي څیړونکو په ځانګړي ډول د AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2 جین ایډیټینګ سیسټم په کارولو سره په Myo6WT/C442Y موږکانو کې په ځانګړي ډول Myo6C442Y mutant allele له مینځه یوړل، او د ناک آوټ څخه د 5 میاشتو په موده کې، د موږکانو د اوریدونکي فعالیت بیرته راستانه شو؛په ورته وخت کې، دا هم لیدل شوي چې په داخلي غوږ کې د ویښتو حجرو د بقا کچه ښه شوې، د سیلیا بڼه منظمه شوې، او د الکترو فزیولوژیکي شاخصونه سم شوي [5].دا په نړۍ کې لومړۍ څیړنه ده چې د CRISPR/Cas9 ټیکنالوژۍ کارول د میراثي کاڼۍ د درملنې لپاره کارول کیږي چې د Myo6 جین بدلون له امله رامینځته کیږي، او دا د میراثي کوڼۍ درملنې لپاره د جین ترمیم ټیکنالوژۍ یو مهم څیړنیز پرمختګ دی.د درملنې کلینیکي ژباړه یو قوي ساینسي اساس چمتو کوي.
د جین درملنې تحویلي میتودونه
د دې لپاره چې د جین درملنه بریالۍ شي، د DNA ناپاک مالیکولونه نشي کولی په مؤثره توګه حجرو ته د دوی د هایدروفیلیکیت او د فاسفیت ګروپونو منفي چارج له امله ننوځي، او د ضمیمه شوي نیوکلیک اسید مالیکولونو بشپړتیا ډاډمن کولو لپاره، یو خوندي او اغیزمن میتود باید وټاکل شي.ضمیمه شوي DNA هدف حجرې یا نسج ته سپارل کیږي.AAV په پراخه کچه د ناروغۍ درملنې لپاره د تحویلي وسایط په توګه کارول کیږي ځکه چې د دې لوړ انتاني تاثیر ، ټیټ معافیت ، او د نسج مختلف ډولونو ته پراخه ټرایزم.اوس مهال، د څیړنې یوې لویې ډلې د موږک کوکلیا کې د مختلف حجرو ډولونو په پرتله د AAV د مختلف فرعي ډولونو ټراپیزم مشخص کړی.د AAV تحویلي ځانګړتیاو کارول د حجرو ځانګړي پروموټرانو سره یوځای کولی شي د حجرې ځانګړي بیان ترلاسه کړي ، کوم چې کولی شي د هدف څخه لرې اغیزې کم کړي.برسېره پردې، د دودیزو AAV ویکتورونو بدیل په توګه، نوي مصنوعي AAV ویکتورونه په دوامداره توګه وده کوي او په داخلي غوږ کې د غوره لیږد وړتیا ښیي، چې AAV2/Anc80L65 خورا پراخه کارول کیږي.د غیر ویروسي تحویلي میتودونه نور په فزیکي میتودونو ویشل کیدی شي (مایکرو انجیکشن او الیکټروپوریشن) او کیمیاوي میتودونه (د لیپیډ پراساس ، پولیمر میشته ، او د سرو زرو نانو ذرات).دواړه طریقې د میراثي کوڼۍ د اختلالاتو په درملنه کې کارول شوي او مختلف ګټې او محدودیتونه یې ښودلي دي.د وسایطو په توګه د جین درملنې لپاره د تحویلي وسایط سربیره ، د ویوو جین ادارې لپاره مختلف طریقې د مختلف هدف حجرو ډولونو ، د ادارې لارې ، او معالجوي موثریت پراساس استخدام کیدی شي.د داخلي غوږ پیچلي جوړښت د هدف حجرو ته رسیدل ستونزمن کوي او د جینوم ترمیم کولو اجنټانو ویش ورو دی.membranous labyrinth د عارضي هډوکي د هډوکي لابراتوار دننه موقعیت لري او د کوکلیر ډکټ، نیم سرکلر ډکټ، یوټریکل او بالون شامل دي.د دې نسبي انزوا، لږ تر لږه د لیمفاټیک جریان، او د وینې څخه د وینې د خنډ په واسطه جلا کول یوازې نوي زیږون موږکانو ته د درملنې اغیزمن سیسټمیک تحویل محدودوي.د جین درملنې لپاره مناسب ویروس ټایټر ترلاسه کولو لپاره ، داخلي غوږ ته د ویروس ویکٹرونو مستقیم محلي انجیکشن اړین دی.د انجیکشن تاسیس شوي لارې عبارت دي له: (1) ګردي کړکۍ جھلی (RWM)، (2) tracheostomy، (3) endolymphatic یا perilymphatic cochleostomy، (4) د کړکۍ ګردي جھلی پلس د ټیوب فینیسټریشن (CF) (لکه څنګه چې په 3 شکل کې دی).
انځور3.د جین درملنې داخلي غوږ تحویلي.
که څه هم د جین درملنې په برخه کې ډیری پرمختګونه شوي، د کلینیکي ژباړې اهدافو پراساس، ډیر کار ته اړتیا ده مخکې له دې چې د جین درملنه د جینیاتی ناروغیو ناروغانو لپاره د درملنې لومړۍ کرښه انتخاب شي، په ځانګړې توګه د خوندي او اغیزمن ویکتورونو پراختیا او د تحویلي میتود په برخه کې.مګر موږ باور لرو چې په نږدې راتلونکي کې، دا ډول درملنې به د شخصي درملنې یوه برخه شي او د جنیټیک اختلالاتو او د دوی د کورنیو په ژوند به خورا مثبت اغیزه ولري.
Foregene د هدف شوي جینونو لپاره د لوړې کچې سکرینینګ کټ هم په لاره اچولی ، کوم چې ګړندی دی او کولی شي د RNA استخراج پرته د ریورس لیږد او qPCR عکس العملونه ترسره کړي.
د محصول لینکونه
د سیل مستقیم RT-qPCR کټ — تکمان/SYBR ګرین I
د نورو محصولاتو معلوماتو لپاره، مهرباني وکړئ اړیکه ونیسئ:
د پوسټ وخت: سپتمبر-02-2022
