• فیسبوک
  • لینکډین
  • یوټیوب

د A260/A230 ټیټ تناسب معمولا د ناپاکۍ له امله رامینځته کیږي چې د اعظمي جذب څپې په 230nm کې وي.راځئ وګورو چې دا نجاستونه څه دي:

  • عام ککړونکي

    د جذب طول موج

    د تناسب اغیز

    پروټین

    ~230nm او 280nm

    په ورته وخت کې د A کمښت260/A ۲۸۰او الف260/A ۲۸۰نسبت

    ګوانډین مالګه

    220-240 nm

    A کم کړئ260/A ۲۸۰تناسب

    فینول

    ~270nm

    -

    ټریزول

    ~230nm او 270nm

    A کم کړئ260/A ۲۸۰تناسب

    EDTA

    ~230nm

    A کم کړئ260/A ۲۸۰تناسب

    ایتانول

    230-240 nm

    A کم کړئ260/A ۲۸۰تناسب

 
 
 
د عام ککړونکو د جذب څپې اوږدوالی او برعکس ارزښت

Pد روټین ککړتیا
د پروټین ککړتیا د نیوکلیک اسید استخراج پروسې کې ترټولو عام ککړتیا ګڼل کیدی شي.پروټین د اوبو پورتنۍ مرحلې او ښکته برخې ترمینځ شتون لريعضويپړاوککړتیا به په ورته وخت کې د A260/A280 او A260/A230 تناسب راټیټ کړي، او د A260/A230 نسبت به د A260/A280 تناسب په پرتله ډیر څرګند بدلون ومومي.
وروسته په ترڅ کېبرعکس نقلor د qPCR عکس العملونه, د پروټین پاتې شونه کولی شي د انزایم فعالیت مخه ونیسي یا مداخله وکړي.د پروټین د ککړتیا څخه د مخنیوي ترټولو غوره لاره دا ده چې د سپرناټینټ تمه کولو پر مهال "د ډیر څخه لږ، لږ مقدار ډیری وختونه" اصول په پام کې ونیسئ.

2. د ګوانډینیم ککړتیا
هایدروکلورایډ (GuHCl) او guanidine thiocyanate (GTC) د پروټینونو د تخریب کولو اغیز لري، کوم چې کولی شي د نیوکلیک اسید استخراج پروسې په جریان کې د حجرو غشا په چټکۍ سره ویجاړ کړي، د پروټین د تخریب او ورښت لامل کیږي.د GuHCl او GTC د جذب څپې اوږدوالی د 220-240 nm ترمنځ دی، اود ګوانډینیم پاتې مالګه به د A260/A230 تناسب کم کړي.که څه هم د پاتې guanidinium مالګه به تناسب کم کړي،د لاندې زیرمو تجربو اغیزه په حقیقت کې د پام وړ نه ده.

3. د Trizol ککړتیا
د Trizol اصلي برخه فینول دی.د فینول اصلي دنده د حجرو لیز کول او په حجرو کې پروټینونه او نیوکلیک اسید مواد خوشې کول دي.که څه هم فینول کولی شي په مؤثره توګه پروټینونه رد کړي، دا نشي کولی په بشپړ ډول د RNase فعالیت منع کړي.له همدې امله، 8-hydroxyquinoline، guanidine isothiocyanate، β-mercaptoethanol، او نور په TRIzol کې اضافه شوي ترڅو د Endogenous او exogenous RNase مخنیوی وکړي.
کله چې د سیلولر RNA استخراج کول، Trizol کولی شي په چټکۍ سره حجرې لیز کړي او د حجرو څخه خوشې شوي نیوکلیز منع کړي، او پاتې پاتې Trizol به د پام وړ د A260/A230 تناسب کم کړي.
د پروسس کولو طریقه: کله چې سینټرفیوګ کول، دا باید په پام کې ونیول شي چې په Trizol کې فینول د 4 درجو او د خونې د تودوخې په حالت کې د اوبو په مرحله کې په اسانۍ سره حل کیږي.

4. د ایتانول پاتې شوني
ایتانول په وروستۍ پروسه کې د DNA د تیرولو لپاره کارول کیږي پداسې حال کې چې د مالګې آئنونه تحلیلوي کوم چې ممکن DNA ته پابند وي.د جذب طول موج تر ټولو لوړ دید جذب لوړوالیایتانول هم په 230-240 nm کې دی، کوم چېد A260/A230 تناسب به هم کم کړي.
د ایتانول د پاتې شونو څخه د مخنیوي طریقه د وروستي اخراج په جریان کې دوه ځله تکرار کیدی شي،فوم هودد دوو دقیقو لپاره اجازه ورکړئ چې ایتانول په بشپړه توګه تبخیر شي مخکې له دې چې د elution لپاره بفر اضافه کړي.
په هرصورت، دا باید معلومه شي چې تناسب یوازې د RNA کیفیت ارزونې شاخص دی.که پورته ذکر شوي عملیات په کلکه تنظیم شي، د تناسب او معیاري سلسلې تر مینځ انحراف به د زیرمو تجربو باندې لوی اغیزه ونلري.
اړوند توليدات:
د څارویو ټول RNA جلا کولو کټ
د نبات ټول RNA جلا کولو کټ
د حجرو ټول RNA جلا کولو کټ
د نبات ټول RNA جلا کولو کټ پلس


د پوسټ وخت: فبروري 10-2023