د څارویو ټول RNA جلا کولو کټ د څارویو نسجونو او حجرو لپاره د RNA د استخراج او پاکولو کټ
د کټ تفصیل:
په چټکه او مؤثره توګه د مختلفو څارویو نسجونو څخه د لوړ پاکوالي او لوړ کیفیت ټول RNA استخراج کړئ.
د RNA تخریب په اړه اندیښنه ته اړتیا نشته.ټول سیسټم د RNase څخه پاک دی
په مؤثره توګه د DNA پاکولو کالم په کارولو سره DNA لرې کړئ
د DNase اضافه کولو پرته DNA لرې کړئ
ساده - ټول عملیات د خونې په حرارت کې بشپړ شوي
چټک عملیات په 30 دقیقو کې بشپړ کیدی شي
خوندي - هیڅ عضوي ریجنټ نه کارول کیږي
لوړ پاکوالی—OD260/280≈1.8-2.1
د کټونو توضیحات
50 تیاری، 200 تیاری
دا کټ مټ کارويسپن کالم او فورمولزموږ د شرکت لخوا رامینځته شوی ، کوم چې کولی شي د لوړ موثریت سره د مختلف څارویو نسجونو څخه د لوړ پاکوالي او لوړ کیفیت ټول RNA استخراج کړي. دا د DNA - پاکولو کالم چمتو کوي ، کوم چې کولی شي په اسانۍ سره جینومیک DNA د سپرناټینټ او نسج لیسټیټ څخه جلا او جذب کړي ، ساده او وخت خوندي کوي؛د RNA-یوازې کالم کولی شي په مؤثره توګه RNA وتړي او د یو ځانګړي فورمول ډیری نمونو سره په ورته وخت کې پروسس کیدی شي.
ټول سیسټم د RNase څخه پاک دی، ترڅو استخراج شوي RNA تخریب نشي؛Buffer RW1، Buffer RW2 بفر د مینځلو سیسټم، ترڅو ترلاسه شوي RNA د پروټین، DNA، آئن، او عضوي مرکباتو ککړتیا څخه پاک وي.
د کټ اجزا
| د څارویو ټول RNA جلا کولو کټ | ||
| د کټ اجزا | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 ټ | 200 ټ | |
| بفر RL1* | 25ml | 100ml |
| بفر RL2 | 15ml | 60ml |
| بفر RW1* | 25ml | 100ml |
| بفر RW2 | 24ml | 96ml |
| RNase وړیا ddH2O | 10ml | 40ml |
| یوازې RNA کالم | 50 | ۲۰۰ |
| د DNA پاکولو کالم | 50 | ۲۰۰ |
| د لارښوونې لارښود | 1 ټوټه | 1 ټوټه |
د محصول معلومات
| بڼه | سپن کالم | د پاکولو برخه | فارجین کالم، ریجنټ |
| فلکس | 1-24 نمونې | د چمتووالي لپاره وخت | ~30 دقیقې (24 نمونې) |
| سنټرفیوج | د میز سنټرفیوج | د Pyrolysis جلا کول | سنټرفیوګال جلا کول |
| نمونه | د څارویو نسج؛حجره | د نمونو مقدار | نسج: 10-20 ملی ګرامه؛حجره:(1-5)×106 |
| د Elution حجم | 50-200 μL | د اعظمي بارولو حجم | 850 μL |
ځانګړتیاوې او ګټې
■ د RNA د تخریب په اړه اندیښنه ته اړتیا نشته؛ټول سیسټم د RNase څخه پاک دی
■ په مؤثره توګه د DNA په کارولو سره د DNA پاکولو کالم لرې کړئ
■ د DNase اضافه کولو پرته DNA لرې کړئ
■ ساده ټول عملیات د خونې په حرارت کې بشپړ شوي
■ چټک عملیات په 30 دقیقو کې بشپړ کیدی شي
■ خوندي - هیڅ عضوي ریجنټ ته اړتیا نشته
■ لوړ پاکوالی -OD260/280≈1.8-2.1
د کټ غوښتنلیک
دا د مختلفو تازه یا منجمد څارویو نسجونو یا کلتور شوي حجرو څخه د ټول RNA استخراج او پاکولو لپاره مناسب دی.
د محصول پیرامیټونه
■ د ښکته کیدو غوښتنلیکونه: د لومړي سټینډ cDNA ترکیب، RT-PCR، مالیکولر کلونینګ، شمالي بلاټ، او نور.
■ نمونې: د څارویو نسجونه، کلتور شوي حجرې
■ خوراک: نسجونه 10-20mg، حجرې (2-5)×106
■ د پاکولو کالم اعظمي د DNA پابند ظرفیت: 80 μg
■ د Elution حجم: 50-200 μl
ډياګرام
د څارویو ټول RNA جلا کولو کټ 20mg درملنه کیږي
د موږک تازه نمونې، د 5٪ خالص RNA 1٪ agar واخلئ
ګلیکوجیل الیکټروفوریسس
۱: تڼی ۲: پښتورګی
۳: ځيګر ۴: زړه
د ذخیره کولو او شیلف ژوند
کټ د 24 میاشتو لپاره د خونې د حرارت درجه (15-25 ℃) یا 2-8 ℃ د اوږدې مودې لپاره زیرمه کیدی شي.بفر RL1 د β-mercaptoethanol (اختیاري) اضافه کولو وروسته د 1 میاشتې لپاره په 4 ℃ کې زیرمه کیدی شي.
نقل شوي مقالې
1.IF: 18.808:Zheng، Q.، Qin، F.، Luo، R.، et al.د مرکزي جامع ډیزاین د اصلاح کولو له لارې د لیور بیس ایډیټ کولو لپاره mRNA-لوډ شوي لیپډ په څیر نانو پارټیکلز.advفعالیت.میټر.2021، 31، 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF: 18.187:He X، Hong W، Yang J، et al.د معالجوي سټیم حجرو په چمتووالي کې د حجرو غیر معمولي اپوپټوسس د فاسفیتایډیلسرین خوشې کولو له لارې معافیتي اغیزې رامینځته کوي.د سیګنال لیږد هدف هلته.۲۰۲۱ جولای ۱۴؛۶(۱):۲۷۰.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF: 17.97: دای زی، لیو ایچ، لیو ج، او نور.د N7-Methylguanosine tRNA تعدیل د آنکوجینک mRNA ژباړې ته وده ورکوي او د انټرایپاټیک کولنګیوکارسینوم پرمختګ ته وده ورکوي.مول سیل.2021 جولای 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225: Cao X، Shu Y، Chen Y، et al.Mettl14-Mediated m6A ترمیم د Endoplasmic Reticulum Homeostasis ساتلو له لارې د ځيګر بیا رغونه اسانه کوي.د حجرو مول Gastroenterol Hepatol.2021؛12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
د RNA د جلا کولو کټونه نورې نمونې سرچینېشتون لري:
حجره، نبات، ویروس، وینه، او نور.
RNA نه استخراج کیږي یا د RNA حاصلات کم دي
ډیری وختونه ډیری فکتورونه شتون لري چې د بیا رغونې موثریت اغیزه کوي، لکه: د نسج نمونې RNA منځپانګې، د عملیاتو طریقه، د اخراج حجم، او داسې نور.
1. یخ حمام یا کریوجینک (4 ° C) سینټرفیوګریشن د عملیاتو په جریان کې ترسره شو.
سپارښتنه: د ټولې پروسې په اوږدو کې د خونې په حرارت (15-25 ° C) کې کار وکړئ، په ټیټ حرارت کې د یخ حمام او سینټرفیوج مه کوئ.
2. د نمونې ناسم ساتل یا د نمونې د ذخیره کولو ډیر وخت.
سپارښتنه: نمونې په -80 °C کې ذخیره کړئ یا په مایع نایتروجن کې کنګل کړئ او د بار بار کنګل کولو څخه ډډه وکړئ؛هڅه وکړئ د RNA استخراج لپاره تازه نسج یا کلتور شوي حجرې وکاروئ.
3. ناکافي نمونه lysis.
سپارښتنه: کله چې نسج همغږي کوي، ډاډ ترلاسه کړئ چې نسج په کافي اندازه همغږي شوي او د نسج حجرې په کافي اندازه ویشل شوي ترڅو د RNA خوشې کولو تشریح کړي.
4. ایلوینټ په سمه توګه نه دی اضافه شوی.
سپارښتنه: تایید کړئ چې RNase-Free ddH2O د پاکولو کالم جھلی په مینځ کې په ښکته خوا کې اضافه کیږي.
5. د مطلق ایتانول صحیح حجم په بفر RL2 یا بفر RW2 کې ندی اضافه شوی.
سپارښتنه: لارښوونې تعقیب کړئ، په بفر RL2 او Buffer RW2 کې د مطلق ایتانول صحیح حجم اضافه کړئ او د کټ کارولو دمخه ښه مخلوط کړئ.
6. د نسج نمونې خوراک مناسب نه دی.
سپارښتنه: د 10-20 ملی ګرامه نسج یا (1-5) × 10 څخه کار واخلئ6حجرې په هر 500 μl بفر RL1 کې، ځکه چې د نسج ډیر کارول کیدای شي د RNA استخراج کم کړي.
7. د اخراج ناسم حجم یا نیمګړتیا.
سپارښتنه: د پاکولو کالم د elution حجم 50-200 μl دی؛که د elution اغیز د قناعت وړ نه وي، نو سپارښتنه کیږي چې د خونې د تودوخې ځای پرځای کولو وخت وغزول شي وروسته له دې چې د ګرم شوي RNase-Free ddH اضافه کړي.2او، د مثال په توګه د 5-10 دقیقو لپاره.
8. د پاکولو کالم د بفر RW2 مینځلو وروسته د ایتانول پاتې شوني لري.
سپارښتنه: که چیرې د بفر RW2 مینځلو وروسته د ایتانول پاتې شوني شتون ولري ، د 1 دقیقو لپاره خالي ټیوب سینټرفیوګریشن ، د خالي ټیوب سینټرفیوګریشن عملیاتو لپاره وخت 2 دقیقو ته لوړ کیدی شي ، یا د پاکولو کالم د 5 دقیقو لپاره د خونې په حرارت درجه کې کیښودل کیدی شي ترڅو په مناسب ډول د پاتې کیدو څخه لرې شي.
پاک شوی RNA تخریب شوی
د پاک شوي RNA کیفیت په فکتورونو پورې اړه لري لکه د نمونې ساتنه، د RNase ککړتیا، او لاسوهنه، او داسې نور.
1. د نسج نمونې په وخت کې نه ساتل کیږي.
سپارښتنه: که د نسجونو نمونې یا حجرې د راټولولو وروسته په وخت سره ونه کارول شي، سمدلاسه په -80 ° C یا مایع نایتروجن کې کریوپریزیر کړئ.د RNA استخراج لپاره، هرکله چې امکان ولري د نوي اخیستل شوي نسج یا حجرو نمونه وکاروئ.
2. د نسجونو د نمونو تکرار کنګل کول.
سپارښتنه: کله چې د نسجونو نمونې ذخیره کړئ، دا غوره ده چې د ساتنې لپاره یې په کوچنیو ټوټو کې پرې کړئ، او د کارولو په وخت کې یوه ټوټه لرې کړئ ترڅو د نمونې د بار بار کنګل کیدو او د RNA تخریب مخه ونیسي.
3. RNase د عملیاتو په جریان کې معرفي کیږي یا د ضایع کیدو وړ دستکشې، ماسک او نور نه اغوندي.
سپارښتنې: د RNA استخراج تجربې په جلا جلا RNA تخریب خونو کې ترسره کیږي او میز د تجربې دمخه پاک شوی.
د تجربې په جریان کې د ضایع کیدو وړ دستکشې او ماسکونه واغوندئ ترڅو د RNase معرفي کیدو له امله رامینځته شوي RNA تخریب کم کړي.
4. Reagents د کارولو په وخت کې د RNase سره ککړ شوي دي.
سپارښتنه: د اړوندو تجربو لپاره د نوي حیواناتو ټول RNA جلا کولو کټ سره بدل کړئ.
5. د سینټرفیوج ټیوبونه، ټیوبونه، او نور د RNA په مینځلو کې کارول کیږي د RNase سره ککړ شوي.
سپارښتنه: تایید کړئ چې د سینټرفیوج ټیوبونه، لارښوونې، پایپټ، او نور د RNA استخراج کې کارول کیږي ټول د RNase څخه پاک دي.
پاک شوي ترلاسه شوي RNA د لاندې زیرمو تجربو اغیزه کوي
RNA د پاکولو کالم لخوا پاک شوی، که چیرې د مالګې آئنونه، د پروټین مینځپانګه ډیره زیاته وي د لاندې زیرمې تجربه اغیزه کوي، لکه: ریورس لیږد، شمالي بلاټ او نور.
1. خارج شوی RNA د مالګې آئن پاتې شونه لري.
سپارښتنه: تصدیق کړئ چې د ایتانول صحیح حجم بفر RW2 کې اضافه شوی او د 2 پاکولو کالم مینځل په سینټرفیوګل سرعت کې ترسره کړئ چې د عملیاتو لپاره ښودل شوي؛که چیرې د مالګې آئن پاتې شي، د پاکولو کالم د خونې په حرارت کې د 5 دقیقو لپاره بفر RW2 ته پریږدئ او سینټرفیوګریشن ترسره کړئ ترڅو د مالګې ککړتیا له مینځه یوسي.
2. په خارج شوي RNA کې د ایتانول پاتې شوني.
سپارښتنه: تایید کړئ چې د بفر RW2 مینځلو وروسته، د خالي ټیوب سینټرفیوګریشن عملیات په هغه سرعت سره ترسره کړئ چې د عملیاتو لپاره ښودل شوي، د خالي ټیوب سنټرفیوګریشن عملیات 2 دقیقو ته لوړ کړئ که چیرې لاهم د ایتانول پاتې شوني وي، یا د ټیوب د ټیوب سینټرفیوګریشن څخه وروسته د 5 دقیقو لپاره د کوټې په حرارت درجه کې پریږدئ ترڅو د ټیوبونو سینټرفیوګریشن بیاکتنه بیرته ترلاسه شي. idue
