د ستونزو تحلیل لارښود

لاندې د هغو ستونزو تحلیل دی چې ممکن د ویروس DNA/RNA استخراج کې ورسره مخ شي، هیله ده چې ستاسو تجربو کې ګټور وي.سربیره پردې، د عملیاتي لارښوونو او د ستونزو تحلیل پرته د نورو تجربوي یا تخنیکي ستونزو لپاره، موږ ستاسو سره د مرستې لپاره تخنیکي مالتړ وقف کړی دی.که تاسو کومه اړتیا لرئ، مهرباني وکړئ موږ سره اړیکه ونیسئ: 028-83360257 یا بریښنالیک:

Tech@foregene.com.

د نیوکلیک اسید استخراج یا د نیوکلیک اسید کم حاصل نشته

معمولا ډیری فکتورونه شتون لري چې د بیا رغونې موثریت اغیزه کوي، لکه: د نمونې نیوکلیک اسید مواد، د عملیاتو طریقه، د elution حجم، او داسې نور.

د عامو لاملونو تحلیل:

1. د یخ حمام یا د تودوخې ټیټه تودوخه (4°C) سینټرفیوګریشن د پروسې په جریان کې ترسره شو.

وړاندیز: د ټولې پروسې په اوږدو کې د خونې په حرارت (15-25 ° C) کې کار وکړئ، د یخ حمام مه کوئ او د ټیټ تودوخې سینټرفیوګریشن مه کوئ.

2. نمونه په ناسم ډول ذخیره شوې وه یا نمونه د ډیر وخت لپاره زیرمه شوې وه.

سپارښتنه: نمونې په -80 ° C کې ذخیره کړئ او د بار بار یخولو او غوړیدو څخه مخنیوی وکړئ؛هڅه وکړئ چې د نیوکلیک اسید استخراج لپاره تازه راټول شوي نمونې وکاروئ.

3. ناکافي نمونه lysis.

سپارښتنه: مهرباني وکړئ ډاډ ترلاسه کړئ چې نمونه او د لیسز کاري محلول په ښه توګه مخلوط شوي او د خونې په حرارت (15-25 ° C) کې د 10 دقیقو لپاره مینځل شوي.

4. د الیونټ غلط اضافه کول.

وړاندیز: ډاډ ترلاسه کړئ چې RNase-Free ddH2O د پاکولو کالم جھلی په مینځ کې د ډراپ په څیر اضافه شوی ، او د پاکولو کالم حلقه کې یې مه پریږدئ.

5. د مطلق ایتانول صحیح حجم په بفر RW2 کې ندی اضافه شوی.

وړاندیز: مهرباني وکړئ لارښوونې تعقیب کړئ، د بفر RW2 ته د مطلق ایتانول صحیح حجم اضافه کړئ او د کټ کارولو دمخه ښه مخلوط کړئ.

6. نامناسب نمونې حجم.

وړاندیز: 200µl نمونه د هر 500µl بفر DRL لپاره پروسس کیږي.د نمونې ډیر پروسس کول به د نیوکلیک اسید استخراج کمیدو لامل شي.

7. نامناسب اخراج حجم یا نیمګړتیا.

سپارښتنه: د پاکولو کالم الیونټ حجم 30-50μl دی؛که چیرې د elution اغیز د قناعت وړ نه وي، نو سپارښتنه کیږي چې د خونې په حرارت کې وخت وغځول شي وروسته له دې چې مخکې ګرم شوي RNase-Free ddH2O اضافه کړئ، لکه 5-10min.

8. ایتانول د بفر RW2 سره مینځل وروسته په کالم کې پاتې کیږي.

وړاندیز: که چیرې ایتانول د بفر RW2 سره د سنټرفیوګریشن وروسته د 2 دقیقو لپاره پاتې شي ، کالم د سینټرفیوګریشن وروسته د 5 دقیقو لپاره د خونې په حرارت کې کیښودل کیدی شي ترڅو پاتې ایتانول په بشپړ ډول لرې کړي.

پاک شوي نیوکلیک اسید تخریب کیږي

د پاک شوي نیوکلیک اسید کیفیت د نمونې په ساتلو، د RNase ککړتیا، عملیات او نورو فکتورونو پورې اړه لري.د عامو لاملونو تحلیل:

1. راټولې شوې نمونې په وخت کې زیرمه شوې نه وې.

وړاندیز: که نمونه د راټولولو وروسته په وخت کې ونه کارول شي، مهرباني وکړئ دا په ټیټ حرارت کې -80 ° C کې ذخیره کړئ.د RNA استخراج لپاره، هڅه وکړئ چې تازه راټول شوي نمونې وکاروئ.

2. نمونې راټول کړئ او په مکرر ډول کنګل او یخ کړئ.

وړاندیز: د نمونو د راټولولو او ذخیره کولو په جریان کې د یخولو او پړسوب (له یو ځل څخه ډیر نه) څخه ډډه وکړئ، که نه نو د نیوکلیک اسید حاصل به کم شي.

3. RNase د عملیاتو په خونه کې معرفي کیږي یا د ضایع کیدو وړ دستکشې، ماسک او نور نه اغوستل کیږي.

سپارښتنه: د RNA استخراج تجربې په یوه جلا RNA عملیاتي خونه کې غوره ترسره کیږي، او د لابراتوار میز باید د تجربې دمخه پاک شي.

د تجربې په جریان کې د ضایع کیدو وړ دستکشې او ماسکونه واغوندئ ترڅو د RNA تخریب څخه مخنیوی وشي چې د RNase معرفي کولو له امله رامینځته کیږي.

4. ریجنټ د کارولو پرمهال د RNase سره ککړ شوی و.

سپارښتنه: د اړوند تجربو لپاره د نوي ویروس DNA/RNA جلا کولو کټ سره بدل کړئ.

5. د سینټرفیوج ټیوبونه او د پایپټ ټیوبونه چې د RNA لاسوهنې لپاره کارول کیږي د RNase سره ککړ شوي دي.

وړاندیز: ډاډ ترلاسه کړئ چې د سینټرفیوج ټیوبونه، د پایپټ لارښوونې، پایپټ او نور د RNA استخراج لپاره کارول کیږي ټول د RNase څخه پاک دي.

پاک شوي نیوکلیک اسید د لاندې زیرمو تجربو اغیزه کوي

DNA او RNA د پاکولو کالم لخوا پاک شوي، که چیرې د مالګې آئن او پروټین مینځپانګه ډیره وي، دا به د لاندې زیرمو تجربو اغیزه وکړي، لکه: PCR امپلیفیکیشن، ریورس ټرانسکرپشن، او نور.

1. خړوب شوی DNA او RNA د مالګې پاتې شونه لري.

وړاندیز: ډاډ ترلاسه کړئ چې د مطلق ایتانول صحیح حجم په بفر RW2 کې اضافه شوی ، او د پاکولو کالم دوه ځله د سنټرفیوګیشن سرعت سره په عملیاتي لارښوونو کې مشخص کړئ؛د مالګې آئن ککړتیا کمولو لپاره سینټرفیوګریشن ترسره کړئ.

2. خړوب شوی DNA او RNA د ایتانول پاتې شونه لري.

وړاندیز: د بفر RW2 سره د مینځلو تصدیق کولو وروسته ، په عملیاتي لارښوونو کې د سینټرفیوګریشن سرعت سره خالي ټیوب سینټرفیوګریشن ترسره کړئ؛که چیرې لاهم د ایتانول پاتې شوني شتون ولري ، تاسو کولی شئ خالي ټیوب سینټرفیوژ کړئ او بیا یې د خونې په حرارت کې د 5 دقیقو لپاره ځای په ځای کړئ ترڅو د ایتانول پاتې شونې تر ډیره حده لرې شي.

لارښود لارښود:

د ویروس DNA او RNA جلا کولو کټ لارښوونې لارښود