مستقیم RT-qPCR کټ
تفصیل
مستقیم RT-qPCR کټ په جلا توګه بسته شوي RT-qPCR بفر او لوړ موثر انزایم چمتو کويمخلوط (Taq、M-MLV、RI)، دا د شاته پای کټونو او سیسټم جوړولو لپاره اسانه کويسمون، په ساده تایید کې.
مشخصات
500T، 50,000T
د کټ اجزا
د کټ منځپانګې (20 μL غبرګون سیسټم) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
۵۰۰ ټ | 50,000 T | |
مستقیم انزایم مخلوط | 500 μL×1 | 50 ملی لیتر×1 |
2× مستقیم RT-qPCR بفر | 1 ملی لیتر×5 | 500 ملی لیتر×1 |
لارښوونه | 1 | 1 |
عملیاتي ګامونه
د ریجنټ چمتو کولو دمخه، په کټ کې ټول ریجینټونه باید د خونې په حرارت کې غوړ شي او په نرمۍ سره مخلوط شي.
A: چمتو کول of کينډۍ او ریجنټ
1. چمتو شوي RNA ټیمپلیټ چمتو کړئ (د RNA ټیمپلیټ استخراج او پاکولو لپاره د Foregene Total RNA Isolation Kit لړۍ کټ څخه کار اخیستل وړاندیز کیږي) یا د نمونې کریک کولو محصول (دا سپارښتنه کیږي چې د فارجین لیسیس سیسټم وکاروئ)، ځانګړي پریمر (10 μM) او نور اړوند مصرفي توکي، وسیله.
2. د 2× مستقیم RT-qPCR بفر، RNase-Free ddH2O او 20× ROX حواله رنګ (که دا وي's ته اړتیا ده) په بکس کې د یخ سره، دا په طبیعي ډول خړوب کړئ، او په نرمۍ سره مخلوط کړئ.
B: چمتو کول of RT-qPCR سیسټم
میز 1 : چمتو کول of RT-qPCR sسیسټم
اجزا | حجم | وروستی تمرکز |
2× مستقیم RT-qPCR بفر | 10 μL | ۱× |
مستقیم انزایم مخلوط | 1μL | |
فارورډ پریمر (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
ریورس پریمر (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
تحقیقات (4 μM) | 1μL | 200nM |
کينډۍ(RNA يا Lysate) | X μL | |
20×ROX حواله رنګ | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
ټول حجم | 20μL |
C: ټاکل د RT-qPCR غبرګون پروګرام
میز 2 : RT-qPCR غبرګونon پروګرام ترتیب (لپاره مثال: دوه-ګام طریقه)
ګام | د حرارت درجه | وخت | سایکلونه | منځپانګه | |
1 | 50℃ | 15 دقیقې | 1* | 1 | برعکس نقل |
2 | 95℃ | 1 دقیقه | 1 | مخکې له ځنډه | |
3 | 95℃ | 10 ثانیې | 40-45 | له منځه وړل | |
60℃ | ۳۰ ثانیې ۲* | انیل/توسیع |
د ذخیره کولو او شیلف ژوند
- کټ باید په -20 کې زیرمه شي± 5℃.د اعتبار موده 12 میاشتې ده.
- د بار بار یخ وهلو دورې (<5 سایکلونو) څخه مخنیوی وکړئ.