مستقیم RT-qPCR Kit II
د کټ تفصیل:
◮مستقیم RT-qPCR کټ، د Foreasy Reverse Transcriptase او Foreasy HS Taq DNA Polymerase په کارولو سره د Foregene لخوا رامینځته شوی، د ځانګړي غبرګون بفر سره، دا کټ د قوي مقاومت او مطابقت سره رامینځته کوي، او دا کولی شي په مستقیم ډول د Foregene Lysis سیسټم د ټیمپلیټ په توګه د غبرګون ازموینه وکړي.دا کټ کولی شي د COVID-19 نیوکلیک اسید کشف کټ او نورو رنځجنیک باکتریا نیوکلیک اسید کشف کټ پراختیا لپاره غوښتنه وکړي.
تفصیل
مستقیم RT-qPCR کټ په جلا توګه بسته شوي RT-qPCR بفر چمتو کوي، لوړ موثر Foreasy HS Taq DNA پولیمریزاو Foreasy Reverse Transscriptase (MMLV)،په ساده تایید کې د شاته پای کټونو رامینځته کولو او سیسټم تنظیم کولو لپاره اسانه کول.
مستقیم RT-qPCR کټ، د Foreasy Reverse Transcriptase او Foreasy HS Taq DNA Polymerase په کارولو سره د Foregene لخوا رامینځته شوی، د ځانګړي غبرګون بفر سره، دا کټ د قوي مقاومت او مطابقت سره رامینځته کوي، او دا کولی شي په مستقیم ډول د Foregene Lysis سیسټم د ټیمپلیټ په توګه د غبرګون ازموینه وکړي.دا کټ کولی شي د COVID-19 نیوکلیک اسید کشف کټ او نورو رنځجنیک باکتریا نیوکلیک اسید کشف کټ پراختیا لپاره غوښتنه وکړي.
دا کټ په مستقیم ډول د IVD محصول برخه کیدی شي ، په اسانۍ او ګړندۍ کارولو سره.دا یوازې اسانه تایید ته اړتیا لري، پرته له دې چې بیا پراختیا ومومي.
مشخصات
500T، 50,000T
د کټ اجزا
| د کټ منځپانګې (20 μL غبرګون سیسټم) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| ۵۰۰ ټ | 50,000 T | |
| Foreasy Revers transscriptase (200 یو/μL) | 50 μL×1 | 1 ملی لیتر×5 |
| Foreasy HS Taq DNA پولیمریز (5 یو/μL) | 100 μL×1 | 1 ملی لیتر×10 |
| 2× مستقیم RT-qPCRبفر | 1 ملی لیتر × 5 | 500 ملی لیتر × 1 |
| لارښوونه | 1 | 1 |
عملیاتي ګامونه
الف: د کينډۍ او reagent چمتو کول
1. چمتو شوی RNA ټیمپلیټ چمتو کړئ (دا سپارښتنه کیږي چې د Foregene Total RNA Isolation Kit لړۍ کټ څخه د RNA ټیمپلیټ استخراج او پاکولو لپاره وکاروئ) یا د کریک کولو محصول نمونه (دا توصیه کیږي چې د فورجین لیسیس سیسټم وکاروئ)، ځانګړي پریمر (10 μM) او نور اړوند مصرفي توکي، وسیله.
2. د 2× مستقیم RT-qPCR بفر، RNase-Free ddH2O او 20× ROX حوالې رنګ (که اړتیا وي) د یخ سره په بکس کې واچوئ، دا په طبیعي ډول خړوب کړئ، او په نرمۍ سره مخلوط کړئ.
ب: د RT-qPCR سیسټم چمتو کول
د غبرګون سیسټم د عکس العمل بفر نیم حجم ترلاسه کړئ (د مثال په توګه ، که چیرې د سیسټم حجم 20 μL وي ، نو دا اړتیا لري 10 μL 2 × مستقیم RT-qPCR بفر ترلاسه کړي.). لپارهد انزایمونو ورته مقدار، موږ دا وړاندیز کووM-MLV: 10-30 U/20 μL غبرګون سیسټم,طاقDNA پولیمیریز:1-2 U/20 μL د غبرګون سیسټمدا زموږ وړاندیز دی، تاسو باید دا ازموینه او تنظیم کړئ)، د RNA ټیمپلیټ، ځانګړي پریمرونه او تحقیقات اضافه کړئ، او RNase-Free ddH اضافه کړئ2O تر 20 μL پورې.د RT-qPCR عکس العمل سیسټم ځانګړی چمتووالی لاندې جدول 1 ته راجع کیدی شي.
جدول 1: د RT-qPCR سیسټم چمتو کول
| اجزا | حجم | وروستی تمرکز |
| 2× مستقیم RT-qPCR بفر | 10 μL | ۱× |
| Foreasy Reverse Transscriptase (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA پولیمریز | 1-2 U | |
| فارورډ پریمر (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ریورس پریمر (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| تحقیقات (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| کينډۍ(RNA يا Lysate) | X μL | |
| 20× ROX حواله رنګ | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| ټول حجم | 20 μL |
یادونه: فارورډ پریمر او ریورس پریمر د هدف جین ځانګړي پریمر دي.د qPCR سیسټم د عملي تجربوي او PCR ماډلونو سره سم تنظیم کیدی شي.موږ د ډیری پریمرونو وروستي غلظت لپاره 400nM وړاندیز کوو.مهرباني وکړئ د چمتو شوي غلظت او وړاندیز شوي وروستي غلظت سره سم د ځانګړو پریمرونو او تحقیقاتو حجم تنظیم کړئ.
1*: د مختلف مقداري PCR وسیلو له مخې د ROX حوالې رنګ مناسب وروستی غلظت غوره کړئ.د عام کمیتي PCR وسیلو غوره ROX حوالې رنګ غلظت په لاندې جدول کې ښودل شوی:
| د کمیتي PCR وسایل | د ROX حواله رنګ وروستی غلظت |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/لومړی ګام،etc | 1× (د مثال په توګه، د 20 μL غبرګون سیسټم کې 1μl 20×ROX ریفرنس ډای اضافه کړئ) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P او Mx4000, etc. | 0.5× (د مثال په توګه، د 20 μL عکس العمل سیسټم کې 0.5μl 20×ROX حواله رنګ اضافه کړئ) |
| د روچ PCR وسیله، د بایو-راډ PCR وسیله، د ایپنډرف مقداري PCR وسیله، او نور. | د ROX حواله رنګ پرته |
د ذخیره کولو او شیلف ژوند
کټ باید په -20 ± 5℃ کې زیرمه شي.دا باید سمدلاسه په -20 ℃ ترموستیټیک یخچال کې زیرمه شي.د اعتبار موده 2 کاله ده که چیرې دا په مناسب حالت کې زیرمه شي.
